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第38卷第8期目次
2020, 38(8): 0-0
[摘要]  (92) [HTML全文] (92) [PDF 4250KB] (8)
摘要:
微型述评
基于化学蛋白质组学的药物靶标鉴定
宫莉, 康经武
2020, 38(8): 877-879  doi: 10.3724/SP.J.1123.2019.12014
[摘要]  (112) [HTML全文] (112) [PDF 753KB] (9)
摘要:
通过药物靶标鉴定,可以建立药物活性与细胞表型之间的联系,阐明药物的作用机理,还可以发现药物的脱靶效应和耐药性机制,发现治疗药物的新靶点,并在药物开发的早期阶段预测可能存在的毒性,降低药物研发失败的风险。目前虽然科学技术取得了飞速发展,但是鉴定药物靶标依然是一件令人生畏的工作。本文对近10年来药物靶标鉴定方面的研究进展,特别是无化学标记的新技术进行了评述。
专论与综述
保健食品中违禁药物检验技术研究进展
陈东洋, 张昊, 冯家力, 曾栋
2020, 38(8): 880-890  doi: 10.3724/SP.J.1123.2019.12017
[摘要]  (114) [HTML全文] (114) [PDF 1501KB] (9)
摘要:
保健食品是适用于特定人群、具有调节作用、不以治疗疾病为目的的食品。随着人们生活水平的提高和对健康的追求,保健食品市场日益增大。目前,制售假冒伪劣保健产品、虚假宣传保健食品功效和欺诈式销售产品是制约保健食品产业可持续发展的主要因素。尤其是保健食品中违禁药物的非法添加,使保健食品的食用安全存在较大隐患,严重降低消费者的信心。对保健食品违禁添加的药物进行有效监管,对保护消费者权益具有十分重要的意义。该综述以与保健功能声称相关的药物药理作用为溯源基础,系统梳理了保健食品中可能非法添加的违禁药物种类,重点介绍常见的8类保健食品违禁药物检测技术进展,包括液相色谱法、液相色谱-质谱法、直接实时分析质谱法、气相色谱-质谱法、核磁共振波谱法、红外光谱法、高分辨质谱法等,以期为保健食品违禁药物检测标准的研制和日常监测提供参考,同时对保健食品中违禁药物添加的趋势和检验技术发展进行了简单展望。
研究论文
4-巯基苯硼酸修饰二维二硫化钼纳米复合材料的制备及其用于N-糖肽特异性富集
张汉卿, 秦伟捷, 张养军
2020, 38(8): 891-899  doi: 10.3724/SP.J.1123.2020.01014
[摘要]  (110) [HTML全文] (110) [PDF 2778KB] (7)
摘要:
蛋白质的N-糖基化修饰在多种生物过程中发挥着至关重要的作用,近年来的许多研究证实异常的蛋白质糖基化与多种疾病的发生发展密切相关,表明糖基化蛋白质具有较大的潜力成为新的生物标志物或者药物靶标。在样本的处理过程中,对N-糖基化肽段进行富集分离后再进行质谱分析已经成为糖蛋白质组学分析前的必要步骤。但是,由于复杂生物样本中N-糖基化肽段的丰度低和离子化效率差等问题,通过质谱鉴定N-糖肽仍然是一项艰巨的任务。研究通过将纳米金线(Au)、4-巯基苯硼酸(4-MPB)与超薄二维二硫化钼(2D-MoS2)进行反应,成功制备了一种用于富集蛋白质N-糖基化肽段的新型功能纳米复合材料(MoS2/Au/4-MPB)。二硫化钼纳米材料的层状结构可以为反应提供大量的可修饰位点,便于修饰纳米金线;功能基团4-巯基苯基硼酸对N-糖肽具有高度的选择性,可以对生物样品中N-糖基化肽段进行特异性富集。使用标准蛋白人免疫球蛋白G(IgG)和牛血清白蛋白(BSA)胰蛋白酶酶切产物对新型功能纳米材料的N-糖基化肽段的富集性能进行评估,其灵敏度达到5 fmol,选择性达到1:1000。将其用于生物样品中N-糖基化肽段的富集,从50 μg尿液外泌体蛋白胰蛋白酶酶切产物中共富集鉴定出768个N-糖肽,归属于377个蛋白质。这些结果表明该新型功能纳米复合材料对复杂生物样品中N-糖肽的选择富集有着巨大的应用潜力,为糖蛋白质组的研究提供了一种新方法。
超高效液相色谱-串联质谱法同时测定血清中12种抗癫痫药物
代静, 高乐虹, 彭方达, 于丽佳, 王朝东, 王玉平, 丁春光
2020, 38(8): 900-905  doi: 10.3724/SP.J.1123.2019.12025
[摘要]  (87) [HTML全文] (87) [PDF 1076KB] (16)
摘要:
建立了超高效液相色谱-串联质谱同时测定血清中加巴喷丁、拉莫三嗪、普瑞巴林、拉考沙胺、左乙拉西坦、托吡酯、奥卡西平、氯硝西泮、丙戊酸钠、卡马西平、苯巴比妥、苯妥英钠12种抗癫痫药物的方法。将非那西丁和氯唑沙宗分别作为正离子和负离子模式下的内标物,血清经乙腈沉淀蛋白质后,取上清液进样分析。采用ACQUITY UPLC BEH C18柱分离,流动相为水和甲醇(均含10 mmol/L甲酸铵),流速为0.4 mL/min。采用电喷雾电离源,在多反应监测和正、负离子模式下分段进行扫描分析。结果表明,12种抗癫痫药物在各自范围内线性关系良好,相关系数均大于0.992,在3个添加水平下方法的加标回收率为90.80%~114.0%,批内精密度RSD≤13.2%,批间精密度RSD≤14.8%。该方法专属性强,灵敏度高,可用于12种抗癫痫药物临床血药浓度监测及药代动力学研究。
液相色谱-四极杆/飞行时间质谱法快速筛查测定药物中芬太尼类物质
邓慧芬, 张建莹, 卞学海, 罗耀, 赵祥龙
2020, 38(8): 906-913  doi: 10.3724/SP.J.1123.2019.11010
[摘要]  (65) [HTML全文] (65) [PDF 3360KB] (7)
摘要:
基于液相色谱-四极杆/飞行时间质谱(LC-QTOF-MS)建立了药物中27种新型毒品芬太尼类物质(芬太尼及其类似物)的同时快速筛查、确证和定量分析方法。样品经5 mL 75%(v/v)乙腈水溶液和5 mL乙腈提取,HLB固相萃取柱净化,电喷雾电离,正离子扫描,TOF-MS和信息依赖性采集(IDA)-MS/MS采集模式检测,外标法定量;建立一级精确质量数据库、保留时间和二级质谱库,实现了固体压片、粉末、液体药物及透皮贴剂中27种芬太尼类物质的快速筛查和确证。在5.00~100 μg/L范围内,27种目标化合物的线性关系良好(r2>0.99)。27种化合物的定量限均为10.0 μg/kg。在维生素C压片、头痛粉、止咳水、透皮贴剂样品中3个添加水平的平均回收率范围分别82.9%~106%、84.8%~106%、86.9%~109%和83.1%~106%,相对标准偏差(RSD)为0.38%~8.71%(n=6)。本方法操作简便,耗时短,灵敏度高,稳定性好,适用于液体和固体药物中芬太尼类物质的筛查检测及定量分析,可显著降低检测成本,具有实际应用价值。
古菌脂质的前处理方法比较及超高效液相色谱-高分辨质谱分析
王小雪, 何祉安, 李欣, 宋庆浩, 邹欣薇, 宋雪瑶, 冯蕾
2020, 38(8): 914-922  doi: 10.3724/SP.J.1123.2019.12009
[摘要]  (70) [HTML全文] (70) [PDF 3816KB] (3)
摘要:
古菌是一类兼具真菌及细菌细胞特征、大多生活在极端环境下的单细胞微生物。由于膜结构及代谢通路的特殊性,研究古菌脂质对深入探究极端环境下生命的正常活动具有重要意义。前处理方法在组学分析中会极大影响最终结果的准确度及可靠性。该文基于超高效液相色谱-高分辨质谱联用(ultra-performance liquid chromatography-high resolution mass spectrometry,UPLC-HRMS)技术,以嗜热嗜压古菌Pyrococcus yayanosii为模式生物,采用Bligh-Dyer加酸法、Folch法、甲基叔丁基醚(methyl tert-butyl ether,MTBE)法及固相萃取(SPE)法提取脂质成分,从提取效率、重复性、歧视性等角度进行方法评价,并最终确定SPE法和MTBE法的提取重复性和提取效率最好,适合高通量古菌全脂质提取。利用SPE提取、高分辨质谱分析对P.yayanosii的常规脂质进行了全面分析,共鉴定到了1402种脂质。本研究旨在为古菌和其他极端微生物的非靶向脂质组学分析和脂质代谢研究提供方法参考。
柱前衍生-高效液相色谱法同时测定血清中氨基酸类及单胺类神经递质
白洁, 王妲, 刘泽平, 张佳琪, 刘丽艳, 韩艳梅
2020, 38(8): 923-928  doi: 10.3724/SP.J.1123.2019.12029
[摘要]  (92) [HTML全文] (92) [PDF 1593KB] (6)
摘要:
以邻苯二甲醛(o-phthalaldehyde,OPA)为衍生试剂,建立了柱前衍生-高效液相色谱(HPLC)同时测定血清中氨基酸类神经递质牛磺酸(Tau)、谷氨酸(Glu)、甘氨酸(Gly)、γ-氨基丁酸(γ-GABA)和单胺类神经递质多巴胺(DA)含量的分析方法。血清与乙醇以1:2的体积比混合,进行蛋白质沉淀后离心,取其上清液,氮吹至近干。前处理后的样品与OPA进行柱前衍生,衍生化产物采用Luna 5u C18色谱柱(250 mm×4.6 mm,5 μm)分离,以柠檬酸-乙酸钠缓冲溶液(pH 3.73)为流动相A、乙腈为流动相B进行梯度洗脱,流速为1.0 mL/min,柱温为30℃,检测波长为338 nm。5种神经递质在各自范围内线性关系良好(r2≥0.9866),检出限为0.10~0.40 μmol/L,不同加标水平下目标物的加标回收率为87.57%~115.31%,相对标准偏差均低于7.80%。方法操作简单,灵敏度高,精密度、线性关系和回收率等方法学指标较好,可实现血清中氨基酸类及单胺类神经递质的同时检测。
多功能离子液体分散液液微萃取结合高效液相色谱法检测人尿中5种邻苯二甲酸酯代谢物
孙倩, 戴浩强, 陈佩佩, 佘慧, 武佳
2020, 38(8): 929-936  doi: 10.3724/SP.J.1123.2019.09026
[摘要]  (73) [HTML全文] (73) [PDF 3258KB] (5)
摘要:
将多功能离子液体与分散液液微萃取(DLLME)技术相结合,建立了测定尿液中5种邻苯二甲酸酯类(PAEs)物质代谢产物的高灵敏度新方法。对影响DLLME效率的各单因素进行了优化,包括萃取剂的种类及体积、分散剂的种类及体积、萃取温度、超声时间、冷却时间、离心时间和盐效应等条件,经过严格的优化,最佳的萃取条件分别为:萃取剂[C8MIM]PF6]35 μL,分散剂[BSO3HMIm]OTf]30 μL和[C4MIM]BF6]120 μL,萃取温度为35℃,超声时间5 min,冷却时间5 min,离心时间5 min,盐析剂NH4PF6 0.1 g。在最佳的萃取条件下,5种PAEs代谢物在0.5~1000 μg/L范围内具有良好的线性关系,决定系数(R2)均大于0.9955,方法检出限为0.16~0.19 μg/L,尿液中添加低中高水平(5、20、100 μg/L)的PAEs代谢物,其回收率为92.9%~105.0%,日内精密度及日间精密度的相对标准偏差(RSD)均小于5.96%,方法学验证各指标及稳定性均符合分析要求。对所采集的10份糖尿病患者的尿液进行检测,并对该人群PAEs代谢物的暴露水平进行评价。结果表明,各PAEs代谢物均有检出,其中邻苯二甲酸单(2-乙基己基)酯(MEHP)的检出率为100%。总之,该方法萃取过程中未添加有毒的有机试剂,均使用多功能离子液体作为萃取剂、分散剂和盐析剂,萃取过程绿色环保,简单高效;方法的灵敏度较高,稳定性较好,适用于人体尿液中痕量PAEs代谢物的检测。
基于硅胶整体材料研磨颗粒的多功能聚乙二醇键合固定相的制备及其在高效液相色谱多模式分离中的应用
梁倩, 周玉红, 张之伦, 黄明贤
2020, 38(8): 937-944  doi: 10.3724/SP.J.1123.2020.03036
[摘要]  (66) [HTML全文] (66) [PDF 4754KB] (2)
摘要:
研究通过对溶胶-凝胶法制备的硅胶整体材料进行研磨、浮选、假晶相转换和水热处理,最终获得了粒径为2~5 μm、孔径为20~60 nm的硅胶颗粒。利用部分含氟的阴离子表面活性剂Capstone FS-66和常用的阳离子表面活性剂十六烷基三甲基溴化铵(CTAB)组成的双胶束模板体系对硅胶基质进行假晶相转换处理;再采用碳酸钠溶液水热处理的方式,进一步扩大孔径。用扫描电镜(SEM)和N2吸附-解吸等温线测量对扩孔处理前后的硅胶整体材料研磨颗粒进行表征,结果清楚地显示了处理前后的形貌变化和差异。随后将含有长链聚乙二醇(PEG)的硅烷键合到扩孔后的硅胶颗粒表面,分别利用元素分析、红外光谱以及热重分析对固定相进行表征,并对固定相进行色谱性能评价。对键合固定相的元素分析和热重分析数据进行分析表明,硅胶表面键合PEG的含量约为8%。研究揭示了利用假晶相转换法与碳酸钠溶液水热处理和长链PEG硅烷修饰的硅胶整体材料颗粒在尺寸排阻色谱分离蛋白质方面的良好分离效果。同时进一步的高效液相色谱评价结果表明,该键合固定相还可用于疏水作用色谱模式分离核糖核酸酶A和溶菌酶,以及可用于亲水作用色谱模式分离吡啶甲酸、左旋多巴、三聚氰胺和邻苯二酚等极性比较强的化合物。研究显示了PEG键合固定相具有多功能性,及其在多模式高效液相色谱分离中的应用潜力。
加速溶剂萃取-磁固相萃取净化-气相色谱-质谱法测定土壤中16种多环芳烃和23种有机氯残留
魏丹, 国明, 吴慧珍, 张菊
2020, 38(8): 945-952  doi: 10.3724/SP.J.1123.2019.12028
[摘要]  (90) [HTML全文] (90) [PDF 2425KB] (4)
摘要:
建立了加速溶剂萃取(ASE)、磁固相萃取净化(MSPE)、气相色谱-质谱(GC-MS)测定土壤中多环芳烃和有机氯残留的方法。ASE萃取溶剂为丙酮-正己烷(1:1,v/v),萃取温度为100℃,萃取压力为11.032 MPa,加热时间为5 min,静态萃取时间为5 min,循环萃取3次,冲洗体积为60%萃取池体积,氮气吹扫100 s。然后采用室温制备法自制ZIF-8/nZVI磁性材料用于净化萃取液,将净化液浓缩定容后进行GC-MS测定。多环芳烃和有机氯的线性范围为5~200 μg/kg,线性相关系数(r2)均大于0.99;目标物的检出限(LOD,S/N=3)为0.04~1.21 μg/kg。所建方法成功用于土壤样品中16种多环芳烃和23种有机氯的测定,在3个加标水平下得到的加标回收率为63.9%~112.1%,相对标准偏差(RSD)为0.4%~26.2%。研究结果表明,该方法具有灵敏度高、重现性好、回收率高等特点,适用于土壤中多环芳烃和有机氯残留的检测。
固相萃取-气相色谱-串联质谱法检测水中18种酚类化合物
李杨, 张书芬, 邢家溧, 应璐, 承海, 郑睿行, 毛玲燕, 李和生
2020, 38(8): 953-960  doi: 10.3724/SP.J.1123.2020.01016
[摘要]  (81) [HTML全文] (81) [PDF 1473KB] (5)
摘要:
当前水中酚类化合物种类不清、危害不明,多种酚类化合物的同时检测方法不成熟,因此建立水中多种酚类化合物同时检测的方法具有重要现实意义。该研究建立了固相萃取结合气相色谱-串联质谱同时检测水中18种酚类化合物的分析方法。实验选择超纯水为空白样品,采用固相萃取技术富集、提取水中的酚类化合物,同时对水样初始pH值、洗脱液的种类、洗脱液的用量等条件进行优化,从而确定出最优的前处理方法,最后利用气相色谱-串联质谱法对不同种类的酚类化合物同时进行定量检测。实验结果表明,在初始水样pH值为3.0、不衍生等条件下,使用10 mL乙酸乙酯洗脱,控制洗脱速度为1 mL/min,经固相柱富集净化,氮吹浓缩后,用气相色谱-质谱仪(EI源)测定,选择离子模式监测,外标法定量。结果表明,以3倍信噪比结合浓度外推法确定方法检出限,为0.04~0.6 μg/L;18种酚类化合物的加标回收率为51.7%~117.3%,相对标准偏差为3.1%~7.4%。应用建立的方法分别检测了河流湖泊水、生活用水、生产用水3大类6种不同的水质。检测结果表明,河流湖泊水中酚类化合物所含种类最多,含量最高。研究建立的方法不需要衍生,简化了前处理方法,操作简单,且准确性高,重复性好,可同时检测复杂水体中多种酚类化合物,能显著提高酚类化合物的分析速率。该方法的建立对我国水中酚类化合物残留水平的控制、检测标准的制定和管理措施的采取,都具有重要的理论和现实意义。
羰基铁粉掺杂整体柱萃取-在线热解吸进样气相色谱-串联质谱法分析茶叶样品中拟除虫菊酯类农药残留
吴永慧, 邓云, 吕亚宁, 淦五二
2020, 38(8): 961-967  doi: 10.3724/SP.J.1123.2019.12019
[摘要]  (85) [HTML全文] (85) [PDF 3550KB] (3)
摘要:
制备了羰基铁粉掺杂硅胶整体柱,用于拟除虫菊酯类农药残留萃取,并与气相色谱-串联质谱(GC-MS/MS)法联用,建立了在线富集、热解吸GC-MS/MS测定茶叶样品中拟除虫菊酯类农药残留方法。研究将端羟基聚二甲基硅氧烷共价键合到SiO2网络表面,并同时键合羰基铁粉。将目标分析物吸附并浓缩在聚二甲基硅氧烷位点上后,利用羰基铁粉的高频感应加热特性成功实现了GC-MS/MS直接气体进样并可达到快速、均匀解吸的目的。实验结果表明,在最佳条件下,本方法的富集倍数可达到约1000倍。拟除虫菊酯类农药残留的检出限为3.8~7.5 μg/kg,相对标准偏差为3.2%~6.8%(n=6)。该方法的提取回收率为97.7%~110.5%,相关系数≥0.9960。该法的吸附容量大,在电磁感应的条件下进行热脱附继而直接与GC-MS结合实现在线分析以及无溶剂洗脱。与常规固相微萃取(SPME)方法相比,该方法具有富集因子高、整体柱吸附容量大、可重复使用、自动化程度高、普适性好等优点。在样品前处理及复杂基质中农药残留的提取方面具有重要的研究意义。
柱前衍生毛细管电泳-电致化学发光法测定日用化妆品中的氨甲环酸含量
王荣, 周敏, 王苏霞, 廖原, 樊雪, 马永钧
2020, 38(8): 968-974  doi: 10.3724/SP.J.1123.2019.12002
[摘要]  (88) [HTML全文] (88) [PDF 860KB] (2)
摘要:
将氨甲环酸进行N-甲基化衍生反应后,其衍生产物能与联吡啶钌电致化学发光试剂产生强的共发光信号,据此建立了毛细管电泳-电致化学发光法高选择性测定日用化妆品试样中氨甲环酸含量的新方法。实验中发现,添加一种Mg2+-海藻糖-SiO32-三元缔合物凝胶至背景电解液中,可极大地改善电泳分离效能。在优化的分析条件下,氨甲环酸和内标物肌氨酸衍生产物的电泳峰可在500 s内达到完全分离,且此两个电泳峰的强度比值与氨甲环酸的初始浓度在10~750 μmol/L的范围内呈良好的线性关系(相关系数r2=0.9993),检出限为3.6 μmol/L(S/N=3)。采用内标法对3种市售牙膏膏体和2种面膜护理液中的氨甲环酸进行了定量测定,测得这些试样中氨甲环酸含量的均值分别为4.05、0.24、6.06 mg/g和51.3、7.98 mg/mL,加标回收率在92.5%~104.0%内,结果令人满意。
基于毛细管电泳的苦参碱转运过程中的血清白蛋白行为成像
赵富荣, 郭明, 邵东伟, 夏琪涵
2020, 38(8): 975-983  doi: 10.3724/SP.J.1123.2019.12034
[摘要]  (75) [HTML全文] (75) [PDF 897KB] (1)
摘要:
利用毛细管电泳(CE)技术在体外条件下建立了苦参碱(MT)与血清白蛋白(SA)相互作用的分析方法。生理条件下通过淌度移动法和前沿分析法(FA)研究苦参碱与血清白蛋白的结合状况,构建配体(MT)-受体(SA)相互作用模型。其中,淌度移动法采用非线性拟合方法获得苦参碱与人血清白蛋白(HSA)结合参数;FA运用非线性回归方程、Scatchard方程、Klotz方程3种方程获得苦参碱与人血清白蛋白结合参数,分析其相互作用状况进而分析模型适用度。利用淌度移动法可知,人血清白蛋白与苦参碱表观结合常数KB为8.072×103 mol/L;利用FA法可知,采用非线性回归方程、Scatchard方程、Klotz方程3种方程获得苦参碱与人血清白蛋白表观结合常数KB分别为1.434×103、1.781×103和2.133×103 mol/L,且二者结合位点数在1.0左右,说明苦参碱与人血清白蛋白作用只有单一类型的结合位点。通过计算分析得到3个方程的相关系数(r),关系为rKlotz > r非线性 > rScatchard。结果表明:淌度移动法和FA法均适用于分析MT-HSA体系的结合状况;由于FA法可以计算出表观结合常数的同时又能计算出结合位点数,因而更适合MT-HSA体系的分析研究;分析比较得出3种方程之中Klotz方程为最适理论模型。结合参数表明,MT-HSA相互作用体系之间发生的结合反应为单一类型的结合位点且结合稳定。相关工作阐明了典型生物碱与血清白蛋白的相互作用机制,可为生物碱的血液输运机制的深入研究提供有益参考。
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第38卷第2期目次
2020, 38(2): 0-0
[摘要]  (276) [HTML全文] (276) [PDF 5095KB] (276)
摘要:
特别策划:第22届全国色谱学术报告会优秀论文专栏
化妆品样品前处理与检测技术研究进展
郭项雨, 陈萌, 孟宪双, 吕悦广, 张楠, 连显会, 王春, 高海燕, 马强
2020, 38(2): 151-161  doi: 10.3724/SP.J.1123.2019.06031
[摘要]  (284) [HTML全文] (284) [PDF 969KB] (284)
摘要:
随着我国经济和人民生活水平的不断提高,作为日常消费品的化妆品产业发展迅猛,其安全性日益受到广泛关注。随之而来的化妆品检测量的大幅增长对检测技术提出了更高的要求。传统样品前处理和检测技术因有机试剂消耗量大,检测通量低、检测周期长已无法满足当前绿色化学发展和高通量检测的需求。对此,科研人员开发了一系列环境友好型前处理技术以及高通量现场快速检测方法,为化妆品质量安全保驾护航。该文综述了当前化妆品样品前处理及检测技术的研究进展,并展望了其发展趋势和应用前景,以期为从事化妆品检测的科研和检验人员提供技术参考。
基于液相色谱-质谱联用的代谢组学技术研究Pokemon诱导的胞内脂代谢变化
金一宝, 李上富, 王珏, 高丹, 刘红霞, 蒋宇扬, 殷果, 王铁杰
2020, 38(2): 162-168  doi: 10.3724/SP.J.1123.2019.08013
[摘要]  (243) [HTML全文] (243) [PDF 2606KB] (243)
摘要:
Pokemon是一种转录抑制因子,能够通过影响染色质的重组或直接与抑癌基因结合而抑制抑癌基因的转录,促使肿瘤形成。该文利用基于液相色谱-质谱联用的代谢组学技术研究了Pokemon在肝癌中调控细胞代谢的作用机制。通过脂质转染,获得了Pokemon高表达的HL7702细胞,分别收集转染后不同时间点的细胞。利用基于液相色谱-质谱联用技术的代谢组学方法,分析胞内代谢物的成分。根据多元统计分析的结果选出差异显著的候选代谢物,通过数据库(METLIN和HMDB)检索、二级图谱比对进行结构解析,确证了36种代谢物。通过KEGG数据库检索发现这些代谢物主要与脂质合成相关。进一步分析发现脂质合成途径中乙酰辅酶羧化酶和脂肪酸合成酶均被激活。结果显示,Pokemon可通过激活细胞中脂质合成通路而影响细胞的代谢。
基于非对称场流分离技术分离表征小米淀粉
张靖, 郭攀攀, 李惠丽, 申世刚, 窦海洋
2020, 38(2): 169-176  doi: 10.3724/SP.J.1123.2019.05014
[摘要]  (216) [HTML全文] (216) [PDF 4977KB] (216)
摘要:
基于非对称场流分离技术耦合多角度激光光散射检测器和示差折光检测器,建立了分离表征小米淀粉的方法。研究了进样量、交叉流流速、半衰期(t1/2)、载液离子强度和pH值对小米淀粉分离效果的影响;考察了该方法的重现性;探究了小米淀粉分子结构。结果表明,在进样体积为50 μL、进样质量浓度为0.50 g/L、交叉流流速为1.2 mL/min、t1/2=3 min、载液为10 mmol/L pH 7.00 NaNO3(含3 mmol/L NaN3)的条件下,小米淀粉分离效果最佳。该方法具有良好的重现性,得到的小米淀粉的回转半径相对标准偏差为3.4%、摩尔质量相对标准偏差为7.0%。
研究快报
基于氧化还原反应界面可视化定量检测辣根过氧化物酶
孔昊, 张强, 张薇, 刘伟文, 曹成喜, 樊柳荫
2020, 38(2): 177-182  doi: 10.3724/SP.J.1123.2019.04030
[摘要]  (255) [HTML全文] (255) [PDF 1612KB] (255)
摘要:
该文建立了一种可视化的、基于氧化还原反应界面移动距离定量检测辣根过氧化物酶(HRP)的方法。比较了隐色结晶紫显色体系和3,3',5,5'-四甲基联苯胺显色体系对HRP的显色效率,并构建了基于3,3',5,5'-四甲基联苯胺显色体系的氧化还原反应电泳滴定模型。同时,文中还设计了适用于该模型的小型化、便携式滴定检测芯片,并对滴定通道凝胶中组分进行了优化。结果表明,界面移动距离与HRP浓度存在对数线性关系,检测灵敏度可达0.002 mg/L,且可在10 min内完成HRP的裸眼检测。该方法不需要配备信号读取装置,用户只需要读取有色界面移动的距离即可实现对待测物的可视化定量检测,对于即时检测具有潜在的应用价值。
专论与综述
基于微流控驱动和控制技术的临床生化分析系统研究进展
袁颖欣, 樊晨, 潘建章, 方群
2020, 38(2): 183-194  doi: 10.3724/SP.J.1123.2019.05006
[摘要]  (240) [HTML全文] (240) [PDF 8370KB] (240)
摘要:
微流控技术具有微量、高效、高通量、微型化、集成化、自动化的特点,为实现现场化、低成本的临床生化分析提供了一条可行的技术途径。针对于目前临床生化分析中复杂流体操控的难点,该文依据系统中采用驱动和控制方式的不同,对各种基于微流控技术的临床生化分析系统进行了分类介绍,同时也介绍了市场上商品化的微流控生化分析仪器,并对其各自特点进行了综合评述。
研究论文
磁性金属有机骨架-聚多巴胺的制备并用于水产养殖水样中阳离子染料的萃取检测
杨晓涵, 吴雯倩, 王彬, 林风, 吴小海, 卢昕
2020, 38(2): 195-205  doi: 10.3724/SP.J.1123.2019.05045
[摘要]  (256) [HTML全文] (256) [PDF 11809KB] (256)
摘要:
利用多巴胺(DA)中的儿茶酚基团能与金属有机骨架晶体(MOFs)中金属离子螯合的原理,以ZIF-67为模板,经DA蚀刻-自聚合形成具有孔洞结构的聚多巴胺(PDA)壳层,制备了磁性-MOFs-PDA(Fe3O4@Z67D)新型材料。多种表征手段验证了材料的形貌、结构和性能。新型材料具有亲水性的表面、纳米级的孔径,以及良好的磁响应,被用作磁固相萃取吸附剂。结合高效液相色谱分析手段,建立了萃取检测亚甲蓝(MB)和结晶紫(CV)两种阳离子染料的新方法。在最优的萃取和色谱分析条件下,MB和CV的线性范围分别为0.5~200 μg/L和0.01~50 μg/L,检出限分别为0.04 μg/L和0.008 μg/L,对两种染料的富集因子分别为777和688。新型材料重复使用10次,其萃取性能未见发生变化。该方法成功应用于检测淡水鱼养殖用水中痕量的MB和CV,加标回收率为82.0%~109.0%,RSD低于2.9%。
基于液相色谱-质谱联用技术的心肌缺血大鼠血清和心肌组织代谢组学
尹春园, 孙明谦, 金龙, 林力, 苗兰, 刘建勋
2020, 38(2): 206-211  doi: 10.3724/SP.J.1123.2019.07019
[摘要]  (203) [HTML全文] (203) [PDF 1327KB] (203)
摘要:
采用异丙肾上腺素诱导心肌缺血大鼠模型,使用液相色谱-质谱法检测血清和心肌中的内源性成分,应用软件对已鉴定的40余种目标成分进行靶向提取,用主成分分析(PCA)、有监督偏最小二乘法判别分析(PLS-DA)对代谢组学数据进行多维度统计分析,筛选潜在生物标志物。与对照组相比,在心肌缺血模型组大鼠血清、组织中检测出18个差异代谢物,涉及精氨酸和脯氨酸代谢、甘氨酸、丝氨酸和苏氨酸代谢、谷氨酰胺和谷氨酸代谢、牛磺酸和亚牛磺酸代谢等多条代谢通路。代谢产物可作为心肌缺血研究中的重要标志物,该研究结果有助于揭示心肌缺血的发病机制,可为临床疾病诊断提供思路。
超高效液相色谱-串联质谱法测定鸡肉中4种蛋白酶抑制剂
吕佳乐, 刘正才, 姚闽娜, 林元地
2020, 38(2): 212-217  doi: 10.3724/SP.J.1123.2019.04047
[摘要]  (237) [HTML全文] (237) [PDF 1334KB] (237)
摘要:
建立了鸡肉中4种蛋白酶抑制剂(沙奎那韦、利托那韦、奈非那韦、茚地那韦)的超高效液相色谱-串联质谱(UPLC-MS/MS)检测方法。样品经30%(v/v)乙腈水溶液(含1%(v/v)三氯乙酸)振荡提取、混合型阳离子交换MCX柱净化,采用Luna® C8色谱柱(150 mm×2 mm,3 μm),以0.2%(v/v)甲酸水溶液(含5 mmol/L乙酸铵)和乙腈为流动相进行梯度洗脱,采用电喷雾电离(ESI+)源和多反应监测(MRM)模式检测。结果表明,在0.1~20.0 μg/L范围内,4种目标化合物呈良好的线性关系,相关系数(r2)大于0.99,方法的定量限(S/N=10)为0.20~0.90 μg/kg;鸡肉组织中4种目标化合物在1.0、2.0和10.0 μg/kg 3个水平下的平均加标回收率为69.0%~106.0%,日内和日间相对标准偏差(RSD)为2.2%~13.8%(n=6)和3.6%~14.6%(n=3)。该法简单、高效、灵敏、准确,可用于鸡肉中沙奎那韦、利托那韦、奈非那韦、茚地那韦残留量的测定。
高效液相色谱-串联质谱法测定动物源性食品中矮壮素残留
肖泳, 吴海智, 袁列江, 唐吉旺, 王淑霞, 王秀, 邓航, 吴林
2020, 38(2): 218-223  doi: 10.3724/SP.J.1123.2019.04036
[摘要]  (203) [HTML全文] (203) [PDF 967KB] (203)
摘要:
建立了高效液相色谱-串联质谱测定动物源性食品中矮壮素残留的分析方法。样品经含1%(v/v)乙酸的乙腈溶液提取、正己烷脱脂、阳离子固相萃取柱(PCX)净化,采用Venusil MP C18(2)色谱柱(150 mm×2.1 mm,3 μm)分离,以乙腈和0.1%(v/v)甲酸水溶液为流动相进行梯度洗脱,采用电喷雾电离、正离子模式扫描,多反应监测模式(MRM)检测,基质匹配标准曲线内标法定量。结果表明:矮壮素在0.200~500 μg/L范围内呈良好线性,相关系数(r2)均不低于0.9993,方法的定量限为0.500 μg/kg;以猪肉、牛肉、羊肉、鸡肉、鸡蛋、猪肾、牛肝、羊肾、鸡肝、牛奶为基质,矮壮素的平均加标回收率为93.4%~101%,相对标准偏差为2.3%~8.0%。该方法基质干扰小,灵敏度高,准确可靠,适用于动物源性食品中矮壮素残留的定量检测。
超高效液相色谱-三重四极杆质谱法检测油脂和油炸食品中7种杂环胺类物质
张晨霞, 马宇翔, 赵天培, 席俊, 李潘, 郭庆, 史莉莉, 汪学德
2020, 38(2): 224-231  doi: 10.3724/SP.J.1123.2019.04046
[摘要]  (217) [HTML全文] (217) [PDF 1222KB] (217)
摘要:
建立了检测油脂及油炸食品中7种杂环胺类物质的超高效液相色谱-三重四极杆质谱(UPLC-MS/MS)的检测方法。以含1%(体积分数)氨水的乙腈溶液为提取液,采用乙腈饱和的正己烷脱脂,以PCX固相萃取柱为净化柱,10 mmol/L甲酸铵溶液(pH 6.8)和乙腈为流动相,采用Waters ACQUITY UPLC BEH C18反相色谱柱(50 mm×2.1 mm,1.7 μm)梯度洗脱,流速为0.3 mL/min,在正离子扫描、多反应监测模式下测定,内标法定量。结果表明,杂环胺类物质在各自范围内,线性关系良好,相关系数大于0.999;在3个加标水平下,杂环胺类物质在油脂和油炸食品中的平均回收率为64.31%~113.8%,相对标准偏差为0.18%~9.26%,检出限(S/N=3)和定量限(S/N=10)分别为0.01~0.14 ng/g和0.09~0.38 ng/g。该方法具有灵敏、准确等优点,适用于油脂和油炸食品中杂环胺的确证检测。
蒜苔中咪鲜胺及其代谢物残留检测方法的研究与比较
陈克云, 李玲, 鞠香, 王艳丽, 刘艳明
2020, 38(2): 232-237  doi: 10.3724/SP.J.1123.2019.04008
[摘要]  (218) [HTML全文] (218) [PDF 862KB] (218)
摘要:
建立了水解法与QuEChERS法测定蒜苔中咪鲜胺及其代谢物的残留量,并对两种方法进行了比较。在QuEChERS法中,样品经乙腈提取,QuEChERS净化管净化后用气相色谱法测定咪鲜胺及其代谢产物2,4,6-三氯苯酚的含量,基质匹配标准曲线外标法定量;在水解法中,样品经乙腈提取,吡啶盐酸盐水解后,用硫酸磺化,用气相色谱法测定咪鲜胺的含量。结果表明,水解法和QuEChERS法测定的咪鲜胺标准曲线在0.01~2 mg/L范围内均有良好的线性关系,相关系数(r2)均大于0.999。水解法中咪鲜胺的定量限(LOQ)为0.005 mg/kg;QuEChERS法中咪鲜胺的LOQ为0.039 mg/kg、2,4,6-三氯苯酚的LOQ为0.003 mg/kg。在3个不同浓度添加水平下,方法回收率为81.5%~105.4%,相对标准偏差(RSD)为1.3%~6.8%。在测定阳性样品时,水解法可以较为全面地检测出样品中咪鲜胺及其主要代谢物的总量,QuEChERS法可以检测出咪鲜胺及其主要代谢物2,4,6-三氯苯酚的存在形式和各自的含量,两种方法可以互相补充用于蒜苔中咪鲜胺及其代谢物的检测和确证。
羟基封端聚丁二烯的临界点色谱定量方法研究
汪明芳, 贾强强, 王月荣, 章弘扬, 张敏, 胡坪
2020, 38(2): 238-243  doi: 10.3724/SP.J.1123.2019.03042
[摘要]  (232) [HTML全文] (232) [PDF 846KB] (232)
摘要:
为建立混合物中羟基封端聚丁二烯(HTPB)的临界点色谱定量方法,以C18为固定相,考察了HTPB在四氢呋喃-乙腈和四氢呋喃-水两种流动相体系下的临界点色谱条件。结果表明,四氢呋喃-乙腈体积比为70.7:29.3以及四氢呋喃-水体积比为92:8时,HTPB的保留值与其相对分子质量无关。将该临界点色谱方法用于胶黏剂混合组分中HTPB的测定,结果表明,HTPB在46.7~216.4 mg/L范围内呈良好线性关系,相关系数(r)>0.99,检出限为4.2 mg/L。自配HTPB和矿物油双组分样品的加标回收率为89.2%~101.1%,相对标准偏差小于0.66%(n=6)。应用该方法对市售聚氨酯胶黏剂进行检测,测定结果为HTPB成分占26.6%。该方法快速、准确,能满足聚合物混合产品的生产质量控制和失效分析的要求。
气相色谱正构烷烃和直链脂肪酸甲酯两种线性保留指数之间的转换方法
李勇, 逄涛, 师君丽, 邓小鹏, 孔光辉, 卢秀萍
2020, 38(2): 244-249  doi: 10.3724/SP.J.1123.2019.05018
[摘要]  (220) [HTML全文] (220) [PDF 1232KB] (220)
摘要:
保留指数是气相色谱中用于化合物结构鉴定的重要工具。本研究对基于正构烷烃和直链脂肪酸甲酯的线性保留指数进行线性拟合,发现在所设定的4种不同的升温条件下两种保留指数之间呈现较为固定的线性关系:在弱极性柱(固定液为5%苯基和95%的甲基聚硅氧烷)和极性柱(固定液为聚乙二醇)条件下,正构烷烃保留指数(y)与脂肪酸甲酯保留指数(x)之间的关系分别为y=1.0051x+318.51(r2=1)和y=1.0362x+562.519(r2=1)。采用文献保留指数对所建立的线性关系进行验证,发现通过公式换算得到的保留指数均在其对应文献值的均值加减方差范围内,说明换算公式真实有效。两种保留指数之间关系的建立对于化合物结构鉴定时扩大保留指数搜索范围、减少保留指数测定实验具有重要意义。
基于气相色谱-质谱的拟靶向代谢组学方法分析大米中脂肪酸
王希越, 明明, 连丽丽, 张浩, 娄大伟
2020, 38(2): 250-254  doi: 10.3724/SP.J.1123.2019.05041
[摘要]  (289) [HTML全文] (289) [PDF 1356KB] (289)
摘要:
建立了一种基于气相色谱-质谱的拟靶向代谢组学分析方法对大米中脂肪酸进行分析,共检测到16种脂肪酸,并研究了不同大米中脂肪酸的轮廓差异。以提取到饱和脂肪酸和不饱和脂肪酸的总量为评价指标,比较了6种提取方法及4种提取溶剂对脂肪酸提取效率的影响。将该方法用于5种不同大米(稻花香、吉星、金浪子、农大、状元)中脂肪酸的分析,发现稻花香大米中脂肪酸轮廓与其他4种均有较大差异;而金浪子与农大、状元间脂肪酸差异也较大,与吉星脂肪酸轮廓较为相似。该方法简单,有较好的稳定性和准确性,可为大米品质和营养价值改善研究提供基础数据。
液液萃取-分散液液微萃取-气相色谱-质谱联用测定纺织废水中痕量禁用偶氮染料
叶曦雯, 何静, 李莹, 牛增元, 张甜甜, 罗忻, 邹立, 连素梅
2020, 38(2): 255-263  doi: 10.3724/SP.J.1123.2019.07012
[摘要]  (261) [HTML全文] (261) [PDF 1601KB] (261)
摘要:
建立了液液萃取-分散液液微萃取-气相色谱-质谱联用技术测定纺织废水中痕量偶氮染料的方法。废水中的偶氮染料在碱性条件下经连二亚硫酸钠还原成芳香胺后,先用叔丁基甲醚液液萃取、盐酸反萃进行预浓缩及净化;再以乙腈-氯苯体系进行分散液液微萃取,气相色谱-质谱测定。对前处理条件进行了优化,考察了酸碱度及盐效应对芳香胺萃取效率的影响,结果表明:液液萃取过程中加入30 g NaCl,分散液液微萃取过程中加入1 mL 5 mol/L的NaOH调节体系至碱性才能达到较好的萃取效率。在优化的实验条件下,21种目标物均呈现良好的线性关系,其中13种芳香胺的线性范围为0.05~10 μg/L,7种芳香胺的线性范围为0.05~5 μg/L,2,4-二氨基苯甲醚的线性范围为20~100 μg/L,相关系数为0.996~0.999。20种芳香胺的检出限可达0.05 μg/L,2,4-二氨基苯甲醚检出限为20 μg/L。印染、机织、印花等实际废水加标试验表明,方法的回收率为75.6%~115.1%。该方法富集倍数高,检出限低,适用于纺织废水中痕量禁用偶氮染料的检测。