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• 中华裸蒴(Gymnotheca chinensis)作为我国植物的特有属之一^[1]，具有清热利湿等功效，是民间长期用作治疗肺痨咳嗽、腹胀水肿等疾病的传统草药^[2]。2016年，肖世基等^[3]首次从中华裸蒴中分离得到天然产物2-(3-羟基-2-甲氧基苯基)-5-苯基噁唑(Gymnothecaoxazoles A，1)，并测试了该化合物对人肺癌细胞A549的抑制作用，无明显的生物活性(IC₅₀＞50μmol/L)。不过，文献报道一般含有2, 5-二苯基噁唑(PPO)结构的化合物均具有一定的杀菌活性，部分化合物还具有辐射防护和放射增敏作用，是国防工业和科学研究中极为常用的有机荧光闪烁剂，在医学、生物及化学化工等领域用于同位素的测定^{[4, 5]}，因此具有一定的研究价值。考虑到该化合物在自然界中的含量极少，全合成是获得此化合物的有效途径。为此，本文对Gymnothecaoxazoles A的合成方法进行研究，选择以2, 3-二羟基苯甲酸为起始原料，通过对羧基甲酯化，3-位羟基的选择性苄基保护，2-位羟基甲醚化，碱性条件下酯水解，再与2-氨基苯乙酮盐酸盐缩合生成重要中间体7，中间体7在P₂O₅作为脱水剂条件下环化得中间体8，最后Pd-C/H₂脱苄基得到1，总收率为20%。反应路线见图式 1。

  图 图式

  

  图 图式  化合物1的合成路线

  Figure 图式.  Synthetic route of compound 1

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  1.1   主要仪器与试剂

  Mercury 400核磁共振谱仪(美国Varian公司)；Xevo G2-S QTof四极杆飞行时间串联质谱仪(美国Waters公司)；Tektronix X-4熔点仪(北京泰克仪器有限公司，温度未经校正)；Tensor 37红外光谱仪(德国Bruker公司)。

  2, 3-二羟基苯甲酸(99%)和2-氨基苯乙酮盐酸盐(98%)购自上海麦克林生化科技有限公司，其他所用试剂均为市售分析纯级试剂。

  1.   实验部分

  1.2   化合物的合成

  2, 3-二羟基苯甲酸甲酯(3)^[6]的合成：将3.0g(19.5mmol)2, 3-二羟基苯甲酸2溶于30mL甲醇中，冰浴下逐滴加入2mL浓硫酸，氮气保护下回流4h。将反应液冷却至室温，减压浓缩蒸除部分甲醇，加入饱和碳酸氢钠至不再产生气泡，用乙酸乙酯(50mL×3)萃取，饱和食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥，减压浓缩，得灰棕色固体3.15g，收率为96%，熔点75~76 ℃。¹H NMR(400MHz，CDCl₃)δ：10.90 (s，1H)；7.38~7.35(m，1H)；7.13~7.09(m，1H)；6.82~6.77(m，1H)；5.84~5.61(m，1H)；3.96(s，3H)；HRMS：理论值C₈H₇O₄[M-H]^-167.0344，实测值167.0347。

  3-苄氧基-2-羟基苯甲酸甲酯(4)^[7]的合成：冰浴下将1.06g(26.8mmol)60%的氢化钠加入到10mL干燥四氢呋喃中，缓慢滴加1.50g(8.9mmol)化合物3的2mL四氢呋喃溶液，冰浴下搅拌1h。加入1.83g(10.7mmol)苄溴，室温反应3h。将反应液倒入20mL冰水中，乙酸乙酯(30mL×3)萃取，无水硫酸钠干燥，减压浓缩后硅胶柱层析(淋洗剂为石油醚/乙酸乙酯，体积比20:1)分离纯化，得白色固体1.56g，收率为68%，熔点78~80℃。¹H NMR (400MHz，DMSO-d₆)δ：10.59(s，1H)；7.45(d，2H，J=7.2Hz)；7.41~7.30(m，3H)；7.29(d，2H，J=8.0Hz)；6.84(t，1H，J=8.0Hz)；5.13(s，2H)；3.88(s，3H)。HRMS：C₁₅H₁₄O₄Na，理论值281.0790 [M+Na]⁺，实测值281.0790。

  3-苄氧基-2-甲氧基苯甲酸甲酯(5)：将1.27g(4.9mmol)化合物4溶于20mL无水DMF中，冰浴条件下加入0.22g(5.4mmol)60%的氢化钠和0.71g(5.0mmol)碘甲烷，氮气保护下40℃反应2h。将反应液倒入10mL冰水中，用乙酸乙酯(50mL×4)萃取，饱和食盐水洗涤(50mL×2)，无水硫酸钠干燥后过滤，滤液减压蒸除溶剂，硅胶柱层析(淋洗剂为石油醚/乙酸乙酯，体积比40:1)分离纯化得无色油状物0.95g，收率为75%。¹H NMR(400MHz, CDCl₃)δ：7.48~7.42(m，2H)；7.42~7.36(m，2H)；7.36~7.31(m，2H)；7.13~7.07(m，1H)；7.07~7.02(m，1H)；5.14(s，2H)；3.95(s，3H)；3.91(s，3H)；¹³C NMR (101MHz，CDCl₃)δ：166.8，152.6，149.7，136.7，128.7，128.1，127.3，126.3，123.8，122.8，118.1，71.1，61.6，52.3；HRMS：C₁₆H₁₆O₄Na，理论值295.0946 [M+Na]⁺，实测值295.0947。

  3-苄氧基-2-甲氧基苯甲酸(6)的合成：将0.95g(3.48mmol)化合物5加入到1.4g(34.8mmol)NaOH的20mL乙醇/水(体积比1:1)溶液中，回流反应3h，蒸除部分乙醇，用1mol HCl调节pH至2，乙酸乙酯(50mL×4)萃取，无水硫酸钠干燥，减压浓缩蒸干，得白色固体0.87g，收率为96%，熔点144~145 ℃。¹H NMR (400MHz，CDCl₃)δ：11.43(s，1H)；7.77~7.74(m，1H)；7.46~7.40(m，4H)；7.39~7.35(m，1H)；7.24~7.21(m，1H)；7.20~7.15(m，1H)；5.16(s，2H)；4.11(s，3H)。HRMS：C₁₅H₁₃O₄，理论值257.0814 [M-H]^-，实测值257.0824。

  3-苄氧基-2-甲氧基-N-(2-氧代-2-苯乙基)苯甲酰胺(7)^[8]的合成：取0.76g(2.94mmol)化合物6和2-氨基苯乙酮盐酸盐0.48g(3.54mmol)溶于20mL DMF，加入0.62g(3.24mmol)1-乙基-(3-二甲基氨基丙基)碳化二亚胺盐酸盐(EDCI)、0.44g(3.24mmol)1-羟基苯并三唑(HOBT)和0.40g(3.98mmol)三乙胺，室温反应24h。反应完全后将反应液倒入20mL蒸馏水中，二氯甲烷(50mL×4)萃取，饱和氯化钠(50mL×2)洗涤，无水硫酸钠干燥，减压浓缩后硅胶柱层析(淋洗剂为石油醚/乙酸乙酯，体积比5:1)分离纯化得白色固体0.82g，收率为71%，熔点110~112 ℃。¹H NMR (400MHz，CDCl₃)δ：9.26(s，1H)；8.06~8.02(m，2H)；7.81~7.77(m，1H)；7.66~7.60(m，1H)；7.55~7.50(m，2H)；7.49~7.46(m，2H)；7.44~7.39(m，2H)；7.38~7.34(m，1H)；7.15~7.11(m，2H)；5.16(s，2H)；5.05~4.98(m，2H)；4.10(s，3H)；¹³C NMR (101MHz，CDCl₃)δ：194.2，165.1，151.8，148.6，136.5，134.6，133.9，128.9，128.6，128.1，127.9，127.3，126.0，124.1，123.3，117.7，71.1，61.5，47.1；HRMS：C₂₃H₂₂NO₄，理论值376.1549 [M+H]⁺，实测值376.1551。

  2-(3-苄氧基-2-甲氧基苯基)-5-苯基噁唑(8)的合成：取0.26g(0.69mmol)化合物7加入到48mL封管中，再加入5mL吡啶和0.11g(0.76mmol)五氧化二磷，拧紧封盖，120℃下反应4h。反应液用5%HCl调节pH=3，二氯甲烷(20mL×3)萃取，无水硫酸钠干燥，减压浓缩后硅胶柱层析(淋洗剂为石油醚/乙酸乙酯，体积比1:2)分离纯化得白色固体0.19g，收率75%，熔点129~130℃。¹H NMR(400MHz，CDCl₃)δ：7.76~7.73(m，2H)；7.67(dd，J=7.6，1.6Hz，1H)；7.51~7.47(m，3H)；7.47~7.38(m，4H)；7.37~7.32(m，2H)；7.15~7.05(m，2H)；5.19(s，2H)；4.07(s，3H)；¹³C NMR (101MHz，CDCl₃)δ：159.4，152.9，151.3，148.3，136.9，129.0，128.7，128.4，128.1，127.4，124.3，123.4，122.3，121.9，116.6，71.1，61.4。HRMS：C₂₃H₂₀NO₃，理论值358.1443[M+H]⁺，实测值358.1439。

  2-(3-羟基-2-甲氧基苯基)-5-苯基噁唑(gymnothecaoxazoles A)(1)的合成：取0.10g(0.28mmol)化合物8加入10mL反应瓶中，加入4mL乙酸乙酯和0.03g(0.28mmol) 10%钯碳，氢气环境下剧烈搅拌，室温反应6h，将反应液抽滤，滤液减压浓缩，石油醚-甲醇重结晶，得白色固体0.06g，收率为80%。¹H NMR (400MHz，(CD₃)₂CO)δ：8.35(s，1H)；7.72(d，J=7.6Hz, 2H)；7.58(s，1H)；7.42(dd，J=7.6、1.6Hz，1H)；7.37(t，J=7.6Hz，2H)；7.26(t，J=7.6Hz，1H)，7.01~6.92(m，2H)；3.84(s，3H)；¹³C NMR (101MHz，(CD₃)₂CO)δ：160.1，152.3，152.0，147.0，129.9，129.3，129.1，125.5，124.9，124.5，122.6，121.2，119.3，61.6。HRMS：C₁₆H₁₄NO₃，理论值268.0974 [M+H]⁺，实测值268.0978。

  2.   结果与讨论

  在目标化合物gymnothecaoxazoles A的合成过程中，最初采用的合成路线是直接将起始原料2, 3-二羟基苯甲酸的羧基和3-位羟基用苄溴保护后再对2-位羟基甲基化，但由于空间位阻过大而收率较低。于是根据需要对路线进行了优化，选择先将羧基甲酯化，再选择性地对3-位羟基进行苄基保护，最后对2-位羟基进行甲基化合成重要中间体5，收率明显提高。接下来化合物5经过水解、胺化得到α-酰胺基取代酮7，再在P₂O₅作为脱水剂的条件下经过Robinson-Gabriel法关环合成了噁唑环，此步反应需要在封管中无水条件下进行。最后一步是Pd-C/H₂催化下的还原脱苄基保护得到天然产物gymnothecaoxazoles A，总收率为20%。本文的合成路线原料廉价易得、反应条件温和、操作简单，能够方便快捷地制备gymnothecaoxazoles A。

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  图式  化合物1的合成路线

  Scheme   Synthetic route of compound 1

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