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• 黄酮类化合物是植物在长期自然选择过程中产生的一类次生代谢产物^[1].黄酮类化合物作为重要的天然多酚类产物, 不仅广泛存在于高等植物, 也存在于许多低等植物中, 尤其在芸香科、豆科、石南科、唇形科等高等绿色植物中的分布较多^[2].黄酮类化合物不仅数量繁多, 而且结构类型复杂多样.黄酮类化合物结构类型的复杂多样性注定了其具有广谱的药理活性, 例如抗氧化、抗肿瘤、抗炎、抗病毒、免疫调节、解毒护肝和细胞保护等^[3~10].同时黄酮类化合物因其相对较低的毒性, 在临床应用上对人类的肿瘤、抗衰老、心血管疾病以及退行性疾病的预防和治疗发挥了重要作用.随着越来越多的黄酮类化合物及其药理功能的发现, 黄酮类化合物已成为国内外天然药物研究、开发和利用的热点^{[11, 12]}.

  中药大蓟为菊科植物蓟(Cirsium japonicum DC.)的干燥地上部分.大蓟性甘、苦、凉, 具有凉血止血、行瘀消肿、降血压、抗菌等药理作用, 是一种应用范围广, 临床疗效显著的止血药.大蓟的化学成分复杂, 到目前为止, 已从大蓟中分离得到100多种化合物, 主要有黄酮及黄酮苷类、挥发油类、长链炔醇类、木脂素类及其他类化合物.其中黄酮和黄酮苷类化合物是大蓟所含成分中最多的一类, 也是目前发现的主要活性成分.在大蓟所含有的黄酮和黄酮苷类化合物中, 柳穿鱼黄素及柳穿鱼叶苷是其代表性化合物, 同时也是大蓟中主要的止血成分^[13].现有研究表明:柳穿鱼黄素具有止血、抗炎^[14]、抗肿瘤^[15]、护肝^[16]以及抑制黑色素生成^[17]等功效.同样作为柳穿鱼黄素芸香糖苷的柳穿鱼叶苷亦具有抗氧化^[18]、抗炎^[14b]、抗肿瘤^{[15, 19]}、降糖^[18]、护肝^[16]以及抑制黑色素生成^[17]等生物活性.

  在天然产物的生物资源合理利用过程中, 由含量较高、提取分离较为容易的天然产物半合成生物活性更强的类似物与衍生物甚至已上市药物, 具有来源丰富、合成步骤少、生产成本低等优点.对现代药物的研究与开发具有重要意义^{[20, 21]}.

  柳穿鱼黄素的全合成已有文献报道^[22], 采用全合成的方法来制备柳穿鱼黄素存在反应步骤较多, 收率较低等不足.本文以商业可得的灯盏花乙素为原料半合成了柳穿鱼黄素及柳穿鱼叶苷, 为它们进一步的生物活性研究奠定物质基础.

  图 1

  

  图 1.  灯盏花乙素、柳穿鱼黄素及柳穿鱼叶苷的结构

  Figure 1.  Structure of scutellarin, pectolinarigenin and pectoli-narin

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  1.   结果与讨论

  柳穿鱼黄素及柳穿鱼叶苷的逆合成分析(图 2)如下:柳穿鱼叶苷的制备可通过柳穿鱼黄素5与芸香糖糖基供体10在相转移催化下的糖苷化后脱除糖环上的保护基实现.柳穿鱼黄素5可通过商业易得的灯盏花乙素2经羧基酯化、酚羟基选择性甲基化以及糖苷水解3步反应制备得到; 芸香糖糖基供体10则经L-鼠李糖糖基供体12与葡萄糖糖基受体8在酸性催化下的糖苷化后端基溴代得到.

  图 2

  

  图 2.  柳穿鱼黄素及柳穿鱼叶苷的逆合成分析

  Figure 2.  Retrosynthetic analysis of pectolinarigenin and pectolinarin

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  基于上述反合成分析, 柳穿鱼黄素5的合成路线如Scheme 1所示.以商业易得的灯盏花乙素2为起始原料, 首先在10 equiv.氯化亚砜催化下将葡萄糖醛酸的羧基酯化, 以93%的收率得到灯盏花乙素甲酯3^[23]; 化合物3中含有3个酚羟基以及3个醇羟基, 利用酚羟基与醇羟基之间反应活性的差异, 可实现两者之间的选择性甲基化.黄酮环上的5-位酚羟基由于分子内氢键的存在, 致使其反应活性相对较弱, 故以N, N-二甲基甲酰胺(DMF)为溶剂、无水碳酸钾为缚酸剂, 控制碘甲烷的加入量, 可以对黄酮环上的6, 4'-位酚羟基选择性甲基化保护, 使用95%乙醇重结晶, 以84%的收率得到淡黄色固体化合物4; 在此需要指出的是, 我们曾尝试碱性条件下以灯盏花乙素2为原料一步反应制备得到化合物4, 遗憾的是反应效果较差, 很难得到我们需要的目标产物.室温下将灯盏花乙素溶于DMF, 在4 equiv.无水碳酸钾的存在下, 缓慢向反应体系中滴加3.5 equiv.的碘甲烷, 滴加完毕反应体系很快成为果冻状, 致使反应难以后继发生.化合物4在酸性条件下糖苷键水解, 以89%的收率得到糖基化受体柳穿鱼黄素5^[23].经过比对, 采用此法合成的柳穿鱼黄素核磁共振图谱与天然产物数据一致^[14b].

  图式 1

  

  图式 1.  柳穿鱼黄素的合成路线

  Scheme 1.  Synthesis of pectolinarigenin

  Reagents and conditions: (a) SOCl₂ (10.0 equiv.), MeOH, 93%; (b) MeI (2.4 equiv.), K₂CO₃ (3.0 equiv.), DMF, 84%; (c) H₂SO₄, EtOH, reflux, 89%

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  在成功制备得到糖基化受体柳穿鱼黄素5后, 我们将合成的重点转移到芸香糖糖基供体10的制备上.其合成路线如Scheme 2所示.我们以价廉易得的D-葡萄糖为原料, 将6-位伯羟基经叔丁基二苯基硅基选择性保护后, 剩余羟基全苯甲酰化保护, 两步一锅法以83%的收率制备得到化合物7.化合物7有α、β两种构型, 其中α构型占比较小, β构型为主要产物, 两者可通过柱层析实现完全分离.以β构型的化合物7为原料, 使用我们课题组发展的以固体负载酸TfOH-SiO₂催化选择性脱除6-位叔丁基二苯基硅基的新方法^[24], 以89%的收率得到糖基受体8.糖基受体8与L-鼠李糖糖基供体12^[25]在促进剂三甲基硅基三氟甲烷磺酸酯的催化下发生糖苷化反应, 以67%的收率制备得到双糖化合物9.化合物9在乙酰溴-甲醇体系下可实现端基溴代, 以88%的收率得到全苯甲酰化的溴代芸香糖糖基供体10.

  图式 2

  

  图式 2.  芸香糖糖基供体的合成路线

  Scheme 2.  Synthesis of benzobromorutinose donor

  Reagents and conditions: (a) TBDPSCl (1.5 equiv.), Im (3.0 equiv.), BzCl (6.0 equiv.), Py, 73%; (b) TfOH-SiO₂ (0.2 equiv.), MeCN, 89%; (c) 12 (1.2 equiv.), TMSOTf (0.15 equiv.), 67%; (d) AcBr (5.0 equiv.), MeOH (3.0 equiv.), AcOH, 8 h, 88%

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  在成功制备得到糖基受体柳穿鱼黄素5以及芸香糖糖基供体10后, 我们首先试验了相转移催化下的糖苷化反应.在相转移催化剂四丁基溴化铵存在的条件下, 将柳穿鱼黄素5与糖基供体10首先室温搅拌下溶于氯仿, 然后向反应体系中加入等体积的0.5 mol/L的碳酸钾溶液^[26].令我们高兴的是45 ℃下加热反应12 h后以48%的收率得到目标化合物前体11, 且反应中未检测到有5-位糖苷化的产物生成.当采用饱和碳酸钾溶液时, 45 ℃下加热反应18 h, 能以62%的收率得到化合物11.化合物11端基质子的化学位移为δ＝5.70, 其偶合常数J＝9.7 Hz, 可以判断其为β构型糖苷键.核磁共振谱图中未发现α构型糖苷键的存在.黄酮糖苷化合物11在四氢呋喃-甲醇-水混合溶剂体系中^[27], 采用2 equiv.的无水碳酸钾可以顺利地脱除糖环上的保护基, 以89%的收率得到需要的最终产物.经过比对, 采用此法合成的柳穿鱼叶苷核磁共振图谱与天然产物数据一致^[14b].

  2.   结论

  柳穿鱼黄素及柳穿鱼叶苷作为中药大蓟中黄酮及黄酮苷类化合物的代表, 具有十分重要的生物活性.本文以商业易得的灯盏花乙素为原料, 经羧基酯化、酚羟基选择性甲基化及糖苷键水解3步反应, 以69.5%的总收率得到柳穿鱼黄素.随后, 得到的柳穿鱼黄素为糖基受体, 全苯甲酰基保护的溴代芸香糖为糖基供体完成了柳穿鱼叶苷的化学合成.终产物及中间体经NMR和HRMS结构确证.该合成方法较之从植物中提取柳穿鱼黄素及柳穿鱼叶苷具有原料易得、操作简单、可大量制备等优点, 为后期深入研究它们的药理活性及结构改造奠定了很好的物质基础.

  图 5

  

  图 5.  柳穿鱼叶苷的合成路线

  Figure 5.  Synthesis of pectolinarin

  Reagents and conditions: (a) TBAB (0.5 equiv.), aq. K₂CO₃, 45 ℃, 18 h, 62%; (b) K₂CO₃ (2.0 equiv.), THF-MeOH-H₂O, 2 h, 89%

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  3.   实验部分

  3.1   仪器与试剂

  熔点采用上海精密科学仪器有限公司制造WRR型熔点仪测定; 核磁共振波谱采用Bruker VANCE-400或600型核磁共振仪测定; 质谱采用Agilent 1946BESI- MS型质谱仪测定; 旋光采用SGW-3自动旋光仪测定.薄层色谱(TLC)采用HSGF₂₅₄(烟台化学工业研究所), 柱层析使用硅胶为200~300目(烟台化学工业研究所).所用试剂和溶剂为市售化学纯或分析纯.

  3.2   实验方法

  3.2.1   灯盏花乙素甲酯(3)的合成

  冰浴下向200 mL甲醇中缓慢滴加氯化亚砜(7.26 mL, 100.00 mmol), 滴加完毕撤去冰浴.室温搅拌1 h后向反应体系中加入灯盏花乙素(2) (4.62 g, 10.00 mmol), 室温继续搅拌反应6 h, 经薄层色谱(TLC) [V(乙酸乙酯):V(异丙醇):V(水)＝4:2:1]检测显示反应完全.减压浓缩得粗品, 将粗品悬浮于100 mL乙酸乙酯, 加热回流30 min后, 自然冷却.过滤, 滤饼用乙酸乙酯洗涤, 真空干燥得黄色固体3 4.42 g, 收率93%. m.p. 277~279 ℃; $[\alpha ]_{\rm{D}}^{{\rm{25}}}$－3.0 (c 0.10, DMSO); ¹H NMR (400 MHz, DMSO- d₆) δ: 12.75 (s, 1H, 5-OH), 10.39 (s, 1H, 4'-OH), 8.63 (s, 1H, 6-OH), 7.93 (d, J＝8.3 Hz, 2H, H-2', H-6'), 7.00 (s, 1H, H-8), 6.94 (d, J＝8.3 Hz, 2H, H-3', H-5'), 6.82 (s, 1H, H-3), 5.27 (d, J＝7.0 Hz, 1H, H-1"), 4.20 (d, J＝9.4 Hz, 1H, H-2"), 3.67 (s, 3H, OCH₃); ¹³C NMR (150 MHz, DMSO-d₆) δ: 182.36, 169.22, 164.13, 161.21, 150.96, 149.01, 146.92, 130.46, 128.47, 121.31, 116.00, 105.89, 102.56, 99.84, 93.52, 75.28, 75.04, 72.76, 71.41, 52.02 (OCH₃); IR (KBr) ν: 3581, 3428, 2027, 1740, 1660, 1577, 1503, 1453, 1353, 1240, 1191, 1084, 830, 744, 586 cm^－1; HRMS calcd for C₂₂H₂₁O₁₂ 477.1033, found 477.1026.

  3.2.2   6, 4'-二甲氧基灯盏花乙素甲酯(4)的合成

  将灯盏花乙素甲酯(3) (1.61 g, 3.38 mmol)悬浮于无水DMF 25 mL, 氮气保护下加入无水碳酸钾(1.40 g, 10.14 mmol), 室温搅拌10 min后注入碘甲烷(0.50 mL, 8.11 mmol).室温搅拌过夜, TLC [V(二氯甲烷):V(甲醇)＝10:1]检测显示反应完全.将反应液倾入1 mol/L盐酸50 mL中, 乙酸乙酯萃取(50 mL×2), 合并有机相, 饱和食盐水100 mL洗涤, 无水硫酸钠干燥.减压浓缩柱层析得黄色固体4 1.43 g, 收率84%. m.p. 256~259 ℃; $[\alpha ]_{\rm{D}}^{{\rm{25}}}$－24.6 (c 0.12, DMSO); ¹H NMR (400 MHz, DMSO-d₆) δ: 12.95 (s, 1H, 5-OH), 8.06 (d, J＝8.8 Hz, 2H, H-2', H-6'), 7.15 (d, J＝8.8 Hz, 2H, H-3', H-5'), 7.11 (s, 1H, H-3), 6.97 (s, 1H, H-8), 5.68 (d, J＝4.0 Hz, 1H), 5.58 (d, J＝5.1 Hz, 1H), 5.45 (d, J＝3.5 Hz, 1H), 5.39 (d, J＝6.7 Hz, 1H, H-1"), 4.23 (d, J＝9.2 Hz, 1H, H-2"), 3.87 (s, 3H, OCH₃), 3.77 (s, 3H, OCH₃), 3.67 (s, 3H, OCH₃), 3.48~3.40 (m, 3H, H-3", H-4", H-5"); ¹³C NMR (150 MHz, DMSO-d₆) δ: 182.38, 169.21, 163.92, 162.49, 156.01, 152.64, 152.17, 132.55, 128.40, 122.74, 114.65, 105.97, 103.43, 99.38, 93.97, 75.70, 75.26, 72.82, 71.34, 60.32, 55.63, 52.00; IR (KBr) ν: 3569, 3517, 3362, 2912, 1741, 1664, 1466, 1365, 1304, 833, 582 cm^－1; HRMS calcd for C₂₄H₂₅O₁₂ 505.1346, found 505.1337.

  3.2.3   柳穿鱼黄素(5)的合成

  将化合物4 (1.51 g, 3.00 mmol)悬浮于60 mL乙醇及10 mL水的混合溶剂中, 室温剧烈搅拌下缓慢滴加10 mL浓硫酸.滴加完毕110 ℃下加热反应10 h, 经TLC [V(二氯甲烷):V(甲醇)＝10:1]检测显示反应完全.停止加热, 自然冷却至室温析出固体, 过滤真空干燥得黄色固体5 0.84 g, 收率89%. m.p. 216~219 ℃; ¹H NMR (400 MHz, DMSO-d₆) δ: 13.04 (s, 1H, 5-OH), 10.74 (s, 1H, 7-OH), 8.03 (d, J＝8.6 Hz, 2H, H-2', H-6'), 7.10 (d, J＝8.6 Hz, 2H, H-3', H-5'), 6.87 (s, 1H, H-3), 6.62 (s, 1H, H-8), 3.86 (s, 3H, OCH₃), 3.76 (s, 3H, OCH₃); ¹³C NMR (150 MHz, DMSO-d₆) δ: 182.17 (C-4), 163.36 (C-2), 162.30 (C-4'), 157.34 (C-7), 152.78 (C-9), 152.43 (C-5), 131.38 (C-6), 128.29 (C-2', C-6'), 122.86 (C-1'), 114.56 (C-3', C-5'), 104.16 (C-10), 103.06 (C-3), 94.31 (C-8), 59.97 (OMe), 55.55 (OMe); IR (KBr) ν: 3924, 3811, 3600, 3457, 3369, 1660, 1620, 1470, 1368, 1274, 1176, 1101 cm^－1; HRMS calcd for C₁₇H₁₄O₆ 314.0790, found 314.0782.

  3.2.4   2, 3, 4-三-(O-苯甲酰基)-6-O-叔丁基二苯基硅基-D-吡喃葡萄糖苯甲酰基苷(7)的合成

  将D-葡萄糖6 (3.60 g, 20.00 mmol)溶于无水吡啶100 mL, 氮气保护下依次加入咪唑(4.08 g, 60.00 mmol)及叔丁基二苯基氯硅烷(TBDPSCl, 7.80 mL, 30.00 mmol).室温搅拌2 h后, 冰浴下缓慢滴加苯甲酰氯(14.03 mL, 120.00 mmol), 滴加完毕后撤去冰浴, 向反应体系中加入4-二甲氨基吡啶(DMAP, 0.24 g, 2.00 mmol), 40 ℃下加热反应8 h.经TLC [V(石油醚):V(乙酸乙酯)＝2:1]检测显示反应完全.加入甲醇10 mL终止反应, 减压蒸除大部分溶剂后将剩余液倾入1 mol/L盐酸300 mL中, 二氯甲烷萃取(100 mL×2), 合并有机相, 饱和食盐水100 mL洗涤, 无水硫酸钠干燥.减压浓缩柱层析得白色泡沫状固体7 12.19 g, 收率73 %. For β isomer m.p. 74~76 ℃; $[\alpha ]_{\rm{D}}^{{\rm{25}}}$ +19.0 (c 0.10, CHCl₃); ¹H NMR (400 MHz, CDCl₃) δ: 8.09 (d, J＝7.5 Hz, 2H, Ph-H), 7.90 (dd, J＝17.2, 8.2 Hz, 6H, Ph-H), 7.66 (d, J＝6.9 Hz, 2H, Ph-H), 7.56 (dd, J＝18.3, 7.5 Hz, 4H, Ph-H), 7.49~7.28 (m, 12H, Ph-H), 7.23 (d, J＝7.0 Hz, 2H, Ph-H), 7.12 (t, J＝7.5 Hz, 2H, Ph-H), 6.25 (d, J＝7.9 Hz, 1H, H-1), 5.95 (t, J＝9.4 Hz, 1H, H-2), 5.83 (dt, J＝12.4, 9.3 Hz, 2H), 4.08 (d, J＝9.7 Hz, 1H), 3.88 (dt, J＝12.0, 7.1 Hz, 2H), 1.01 (s, 9H, H-t-Bu); ¹³C NMR (150 MHz, CDCl₃) δ: 165.95, 165.27, 165.08, 164.80, 135.84, 135.71, 133.89, 133.49, 133.44, 133.36, 133.14, 133.08, 130.32, 129.97, 129.73, 129.69, 129.28, 129.05, 128.92, 128.70, 128.53, 128.46, 127.71, 127.66, 92. 84, 75.87, 73.42, 71.25, 68.79, 62.52, 26.78, 19.32; IR (KBr) ν: 3963, 3740, 3441, 3062, 2938, 1766, 1736, 1598, 1456, 1268, 1081, 1026, 704 cm^－1; HRMS calcd for C₅₀H₄₇O₁₀Si 835.2938, found 835.2927.

  3.2.5   2, 3, 4-三-(O-苯甲酰基)-β-D-吡喃葡萄糖苯甲酰基苷(8)的合成

  将化合物7 (4.18 g, 5.00 mmol)溶于乙腈50 mL, 室温搅拌下加入2.0 mmol/g TfOH-SiO₂ (0.50 g, 1.00 mmol). 60 ℃下加热反应1 h后TLC [V(石油醚):V(乙酸乙酯)＝3:1]检测显示反应完全.过滤, 乙腈洗涤, 减压浓缩柱层析得白色泡沫状固体8 2.65 g, 收率89%. m.p. 159~161 ℃; $[\alpha ]_{\rm{D}}^{{\rm{25}}}$+0.2 (c 0.10, CHCl₃); ¹H NMR (400 MHz, CDCl₃) δ: 8.04 (d, J＝7.6 Hz, 2H, Ph-H), 7.97 (d, J＝7.5 Hz, 2H, Ph-H), 7.89 (dd, J＝15.1, 7.7 Hz, 4H, Ph-H), 7.56 (s, 2H, Ph-H), 7.44 (dd, J＝16.0, 7.9 Hz, 6H, Ph-H), 7.37~7.28 (m, 4H, Ph-H), 6.25 (d, J＝7.8 Hz, 1H, H-1), 6.09 (t, J＝9.8 Hz, 1H, H-3), 5.85 (t, J＝8.8 Hz, 1H, H-2), 5.62 (t, J＝9.6 Hz, 1H, H-4), 4.02 (d, J＝9.6 Hz, 1H), 3.92 (s, 1H), 3.75 (d, J＝12.4 Hz, 1H), 2.68 (s, 1H, 6-OH).; ¹³C NMR (150 MHz, CDCl₃) δ: 166.24, 165.83, 165.21, 164.92, 133.99, 133.93, 133.54, 133.48, 130.31, 130.10, 129.89, 129.87, 128.89, 128.84, 128.83, 128.66, 128.52, 128.48, 92.88, 75.71, 72.76, 70.95, 69.20, 61.06; IR (KBr) ν: 3859, 3742, 3540, 3065, 1732, 1598, 1262, 1087, 707 cm^－1; HRMS calcd for C₃₄H₂₉O₁₀ 597.1761, found 597.1767.

  3.2.6   2, 3, 4-三-(O-苯甲酰基)-α-L-鼠李糖苷-(1→6)- 2, 3, 4-三-O-苯甲酰基-β-D-吡喃葡萄糖苯甲酰基苷(9)的合成

  将糖基受体8 (2.31 g, 3.86 mmol)及全苯甲酰基保护的L-鼠李糖三氯乙酰亚胺酯糖基供体12 (2.87 g, 4.63 mmol)溶于无水二氯甲烷60 mL, 氮气保护下下加入4 Å分子筛2.0 g.室温搅拌30 min后, 冰浴下注入三氟甲磺酸三甲基硅酯(TMSOTf, 0.11 mL, 0.38 mmol), 2 h后TLC [V(石油醚):V(乙酸乙酯)＝3:1]检测显示反应完全.向反应体系中加入0.5 mL三乙胺终止反应, 减压浓缩柱层析得白色泡沫状固体9 2.72 g, 收率67%. m.p. 115~118 ℃; $[\alpha ]_{\rm{D}}^{{\rm{25}}}$+69.5 (c 0.20, CHCl₃); ¹H NMR (400 MHz, CDCl₃) δ: 8.04~7.77 (m, 15H, Ph-H), 7.60~7.28 (m, 20H, Ph-H), 6.26 (d, J＝8.0 Hz, 1H, H-1), 6.05 (t, J＝9.6 Hz, 1H), 5.92~5.78 (m, 2H), 5.74 (s, 1H, H-1'), 5.63 (dt, J＝19.9, 9.8 Hz, 2H), 5.10 (s, 1H), 4.37 (s, 1H), 4.31~4.22 (m, 1H), 4.01~3.97 (m, 2H), 1.30 (d, J＝6.1 Hz, 3H, H-6'); ¹³C NMR (150 MHz, CDCl₃) δ: 165.95, 165.84, 165.48, 165.39, 165.34, 165.20, 164.72, 133.75, 133.52, 133.46, 133.39, 133.36, 133.09, 130.33, 130.24, 130.08, 130.04, 129.67, 129.53, 129.50, 128.96, 128.87, 128.76, 128.71, 128.66, 128.60, 128.56, 128.53, 128.49, 128.34, 98.85, 92.90, 75.25, 72.98, 71.99, 70.68, 69.98, 69.50, 67.35, 67.08, 17.80; IR (KBr) ν: 3750, 3657, 3530, 3435, 3368, 3151, 3067, 2975, 1732, 1601, 1450, 1263, 1099, 711, 586 cm^－1; HRMS calcd for C₆₁H₅₁O₁₇ 1055.3126, found 1055.3118.

  3.2.7   2, 3, 4-三-(O-苯甲酰基)-α-L-鼠李糖苷-(1→6)- 2, 3, 4-三-(O-苯甲酰基)-α-D-吡喃葡萄糖溴苷(10)的合成

  将化合物9 (1.06 g, 1.00 mmol)溶于冰醋酸10 mL, 室温氮气保护下依次加入乙酰溴(0.37 mL, 5.00 mmol)及甲醇(0.12 mL, 3.00 mmol), 室温搅拌8 h后TLC [V(石油醚):V(乙酸乙酯)＝4:1]检测显示反应完全.向反应体系中加入二氯甲烷30 mL稀释, 分别用冷水、饱和碳酸氢钠水溶液、水各20 mL洗涤, 无水硫酸钠干燥, 减压浓缩柱层析得白色固体10 0.88 g, 收率88%. m.p. 169~172 ℃; $[\alpha ]_{\rm{D}}^{{\rm{25}}}$+115.0 (c 0.10, CHCl₃); ¹H NMR (400 MHz, CDCl₃) δ: 8.09 (d, J＝7.6 Hz, 2H, Ph-H), 8.00 (dt, J＝16.0, 8.1 Hz, 6H, Ph-H), 7.92 (d, J＝7.6 Hz, 2H, Ph-H), 7.82 (d, J＝7.6 Hz, 2H, Ph-H), 7.64~7.27 (m, 18H, Ph-H), 6.96 (d, J＝3.8 Hz, 1H, H-1), 6.29 (t, J＝9.8 Hz, 1H, H-3), 5.90~5.73 (m, 3H), 5.65 (t, J＝9.9 Hz, 1H), 5.36 (dd, J＝9.9, 3.9 Hz, 1H), 5.00 (s, 1H, H-1'), 4.69~4.56 (m, 1H), 4.21 (dd, J＝9.5, 6.3 Hz, 1H), 4.03 (d, J＝11.9 Hz, 1H), 3.84 (dd, J＝12.1, 5.0 Hz, 1H), 1.33 (d, J＝6.2 Hz, 3H, H-6'); ¹³C NMR (150 MHz, CDCl₃) δ: 165.96, 165.76, 165.50, 165.45, 165.39, 165.21, 133.87, 133.76, 133.53, 133.48, 133.16, 130.24, 130.14, 130.07, 129.95, 129.85, 129.61, 129.42, 128.99, 128.68, 128.57, 128.50, 128.37, 98.81, 87.20, 74.12, 71.92, 71.71, 69.96, 68.19, 67.20, 66.59, 17.79; IR (KBr) ν: 3920, 3747, 3531, 3091, 2978, 1730, 1602, 1452, 1268, 1105, 711 cm^－1; HRMS calcd for C₅₄H₄₆BrO₁₅ 1013.2020, found 1013.2013.

  3.2.8   2, 3, 4-三-(O-苯甲酰基)-α-L-鼠李糖苷-(1→6)- 2, 3, 4-三-(O-苯甲酰基)-β-D-吡喃葡萄糖柳穿鱼黄素基苷(11)的合成

  将化合物5 (0.49 g, 1.56 mmol), 化合物10 (2.37 g, 2.34 mmol)溶于氯仿30 mL, 室温搅拌下依次加入四丁基溴化铵(0.25 g, 0.78 mmol)及饱和碳酸钾溶液30 mL.室温搅拌10 min, 45 ℃下加热反应18 h后TLC [V(石油醚):V(乙酸乙酯)＝4:1]检测显示反应完全.分液, 水相用二氯甲烷萃取(20 mL×2), 合并有机相, 饱和食盐水50 mL洗涤, 无水硫酸钠干燥.减压浓缩柱层析得白色固体11 1.20 g, 收率62%. m.p. 177~179 ℃; $[\alpha ]_{\rm{D}}^{{\rm{25}}}$ －29.0 (c 0.10, CHCl₃); ¹H NMR (400 MHz, CDCl₃) δ: 12.88 (s, 1H, 5-OH), 8.02~7.98 (m, 6H, Ph-H), 7.93 (dd, J＝11.7, 7.8 Hz, 4H, Ph-H), 7.71 (d, J＝8.8 Hz, 2H, Ph-H), 7.65 (d, J＝7.6 Hz, 2H, Ph-H), 7.58 (t, J＝7.3 Hz, 1H, Ph-H), 7.53~7.42 (m, 6H, Ph-H), 7.40~7.31 (m, 9H, Ph-H), 7.19 (t, J＝7.7 Hz, 2H, Ph-H), 6.92 (s, 1H, H-3), 6.79 (d, J＝8.8 Hz, 2H, H-3', H-5'), 6.48 (s, 1H, H-8), 6.06 (t, J＝9.3 Hz, 1H), 5.98~5.87 (m, 1H), 5.77~5.68 (m, 2H), 5.66 (s, 1H, H-1"'), 5.61 (dd, J＝11.8, 8.6 Hz, 2H), 5.09 (s, 1H), 4.39~4.30 (m, 1H), 4.16~4.05 (m, 2H), 3.94 (dd, J＝11.5, 6.4 Hz, 1H), 3.66 (s, 3H, OMe), 3.63 (s, 3H, OMe), 1.20 (d, J＝6.2 Hz, 3H, H-6"'); ¹³C NMR (150 MHz, CDCl₃) δ: 183.02, 165.85, 165.38, 165.28, 165.18, 164.77, 162.58, 155.26, 154.10, 152.44, 134.66, 133.75, 133.55, 133.51, 133.46, 133.04, 130.04, 129.97, 129.94, 129.83, 129.69, 129.34, 129.32, 129.18, 128.82, 128.80, 128.67, 128.54, 128.51, 128.21, 128.15, 123.34, 114.46, 108.28, 103.99, 100.06, 98.02, 97.37, 74.55, 72.54, 71.76, 71.70, 70.65, 69.91, 69.61, 67.09, 66.89, 61.05, 55.33, 17.59; IR (KBr) ν: 3920, 3747, 3531, 3460, 3417, 3091, 2978, 1730, 1656, 1611, 1572, 1500, 1461, 1360, 1299, 1254, 1185, 1072, 833, 587, 711 cm^－1; HRMS calcd for C₇₁H₅₉O₂₁ 1247.3549, found 1247.3518.

  3.2.9   柳穿鱼叶苷(1)的合成

  将化合物11 (280 mg, 0.22 mmol)溶于甲醇5 mL、四氢呋喃5 mL以及水1 mL的混合溶剂中, 室温搅拌下加入无水碳酸钾(62 mg, 0.45 mmol).室温搅拌反应5 min, 加热至45 ℃继续反应2 h后TLC [V(二氯甲烷):V(甲醇)＝6:1]检测显示反应完全.加入阳离子树脂中和至中性, 过滤, 甲醇洗涤, 有机相减压浓缩得粗品, 将所得粗品悬浮于10 mL乙酸乙酯, 加热回流30 min后, 自然冷却, 过滤, 滤饼用乙酸乙酯洗涤, 真空干燥得淡黄色固体1 124 mg, 收率89%. m.p. 275~277 ℃; $[\alpha ]_{\rm{D}}^{{\rm{25}}}$－45.0 (c 0.28, DMSO); ¹H NMR (400 MHz, DMSO-d₆) δ: 8.04 (d, J＝8.5 Hz, 2H, H-2', H-6'), 7.17 (d, J＝8.6 Hz, 2H, H-3', H-5'), 6.95 (s, 2H, H-3, H-8), 5.13 (d, J＝6.3 Hz, 1H, H-1"), 4.56 (s, 1H, H-1"'), 3.89~3.86 (m, 1H), 3.85 (s, 3H, OMe), 3.76 (s, 3H, OMe), 3.69~3.60 (m, 2H), 3.47 (dd, J＝10.2, 6.9 Hz, 2H), 3.43~3.37 (m, 1H), 3.35~3.27 (m, 2H), 3.16 (dd, J＝19.9, 10.3 Hz, 2H), 1.05 (d, J＝6.0 Hz, 3H, H-6"'); ¹³C NMR (150 MHz, DMSO-d₆) δ: 182.22 (C-4), 163.94 (C-2), 162.25 (C-4'), 159.39 (C-7), 152.39 (C-9), 152.05 (C-5), 132.53 (C-6), 128.29 (C-2', C-6'), 122.57 (C-1'), 114.62 (C-3', C-5'), 105.75 (C-10), 103.23 (C-3), 100.24 (C-1"'), 100.20 (C-1"), 94.19 (C-8), 76.30 (C-3"), 75.60 (C-5"), 73.00 (C-2"), 71.85 (C-4"'), 70.61 (C-3"'), 70.28 (C-2"'), 69.35 (C-4"), 68.17 (C-5"'), 65.80 (C-6"), 60.18 (6-OMe), 55.41 (4'-OMe), 17.61 (C-6"'); IR (KBr) ν: 3460, 3417, 2932, 1656, 1611, 1572, 1500, 1461, 1360, 1299, 1254, 1185, 1072, 833, 587 cm^－1; HRMS calcd for C₂₉H₃₅O₁₅ 623.1976, found 623.1987.

  辅助材料(Supporting information)  中间体及终产物的¹H NMR及¹³C NMR谱图.这些材料可以免费从本刊网站(http://sioc-journal.cn/)上下载.

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  图 1  灯盏花乙素、柳穿鱼黄素及柳穿鱼叶苷的结构

  Figure 1  Structure of scutellarin, pectolinarigenin and pectoli-narin

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  图 2  柳穿鱼黄素及柳穿鱼叶苷的逆合成分析

  Figure 2  Retrosynthetic analysis of pectolinarigenin and pectolinarin

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  图式 1  柳穿鱼黄素的合成路线

  Scheme 1  Synthesis of pectolinarigenin

  Reagents and conditions: (a) SOCl₂ (10.0 equiv.), MeOH, 93%; (b) MeI (2.4 equiv.), K₂CO₃ (3.0 equiv.), DMF, 84%; (c) H₂SO₄, EtOH, reflux, 89%

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  图式 2  芸香糖糖基供体的合成路线

  Scheme 2  Synthesis of benzobromorutinose donor

  Reagents and conditions: (a) TBDPSCl (1.5 equiv.), Im (3.0 equiv.), BzCl (6.0 equiv.), Py, 73%; (b) TfOH-SiO₂ (0.2 equiv.), MeCN, 89%; (c) 12 (1.2 equiv.), TMSOTf (0.15 equiv.), 67%; (d) AcBr (5.0 equiv.), MeOH (3.0 equiv.), AcOH, 8 h, 88%

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  图 5  柳穿鱼叶苷的合成路线

  Figure 5  Synthesis of pectolinarin

  Reagents and conditions: (a) TBAB (0.5 equiv.), aq. K₂CO₃, 45 ℃, 18 h, 62%; (b) K₂CO₃ (2.0 equiv.), THF-MeOH-H₂O, 2 h, 89%

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