爪哇毛霉脂肪酶催化合成2-氨基噻吩衍生物

引用本文: 卢粤, 姜国芳, 谢宗波, 陈国庆, 乐长高. 爪哇毛霉脂肪酶催化合成2-氨基噻吩衍生物[J]. 有机化学, 2018, 38(7): 1837-1841. doi: 10.6023/cjoc201801047 shu

Citation: Lu Yue, Jiang Guofang, Xie Zongbo, Chen Guoqing, Le Zhanggao. Synthesis of 2-Aminothiophene Derivatives Catalyzed by Amano Lipase M from Mucor javanicus[J]. Chinese Journal of Organic Chemistry, 2018, 38(7): 1837-1841. doi: 10.6023/cjoc201801047 shu

爪哇毛霉脂肪酶催化合成2-氨基噻吩衍生物

东华理工大学应用化学系南昌 330013

通讯作者: 姜国芳, zbxie@ecit.cn; 乐长高, zhgle@ecit.cn

基金项目:

国家自然科学基金（Nos.21462001，21262002，21465002）、江西省科技计划（No.20161BCB24006）、江西省教育厅科技（Nos.KJLD14050，GJJ150584）资助项目

摘要: 以α-活性亚甲基腈和2，5-二羟基-1，4-二噻烷为原料，通过爪哇毛霉脂肪酶催化的Gewald反应合成了一系列2-氨基噻吩类化合物.该方法与传统的化学催化方法相比，具有反应条件温和、催化剂可生物降解、底物适用范围较宽泛等优点.

关键词:

English

Synthesis of 2-Aminothiophene Derivatives Catalyzed by Amano Lipase M from Mucor javanicus

Department of Applied Chemistry, East China University of Technology, Nanchang 330013

Corresponding author: Jiang, Guofang, E-mail: zbxie@ecit.cn; Le, Zhanggao, E-mail: zhgle@ecit.cn

Received Date: 30 January 2018
Revised Date: 17 March 2018
Available Online: 01 July 2018
Fund Project:

Project supported by the National Natural Science Foundation of China (Nos. 21462001, 21262002, 21465002), the Science and Technology Projects of Jiangxi Province (No. 20161BCB24006), the Science and Technology Foundation of the Jiangxi Provincial Education Department (Nos. KJLD14050, GJJ150584)

Abstract: A series of 2-aminothiophene derivatives were synthesized by the Gewald reaction between α-active methylene nitrilthes and 2, 5-dihydroxy-1, 4-dithiane using amano lipase M from Mucor javanicus as biocatalyst. The method has the advantages of mild reaction conditions, biodegradability of catalyst and wide range of substrates compared with traditional catalysts.

Key words:

2-氨基噻吩类化合物广泛应用于医药^[1]、农药^[2]、染料^[3]、新型功能材料^[4]等领域, 此类化合物主要通过Gewald反应^[5]来制备, 该反应一般由有机胺类物质^[6]、Lewis酸^[7]、无机固体碱^[8]、离子液体^[9]和L-脯氨酸^[10]等作为催化剂, 通过α-活性亚甲基腈与巯基醛(或酮)环化缩合反应而形成的; 此外, 微波^[11]和超声波^[12]等技术也用于Gewald反应中.然而, 这些方法还存在催化剂负载量高、反应时间长、催化剂难回收、合成步骤多和收率低等不足.因此, 探索2-氨基噻吩类化合物的绿色合成方法仍具有积极意义.

生物催化作为绿色化学的重要研究方向, 倍受化学工作者关注.生物催化, 即以酶^[13]或生物有机体^[14]为催化剂进行的化学转化过程, 酶作为绿色、高效、专一和可生物降解的催化剂, 已广泛用于药物、农用化学品和药物中间体^[15]的合成中.而研究者近来又发现, 酶不仅有专一性^[16], 还具有非专一性^[17], 即酶可以催化传统反应外多种其它的有机反应, 如脂肪酶^[18]可以催化Mannich反应^[19]、Aldol反应^[20]和Knoevenagel反应^[21], 蛋白酶可以催化Michael加成反应^[22]、Henry反应^[23]和Friedl nder反应^[24]等.出于对酶非专一性研究的持续关注, 本文以活性腈和2, 5-二羟基-1, 4-二噻烷为原料, 通过爪哇毛霉脂肪酶催化的Gewald反应, 合成了一系列2-氨基噻吩类化合物(Eq. 1).

(1)

1. 结果与讨论

首先选择2, 5-二羟基-1, 4-二噻烷与氰乙酰胺的环缩合反应为模板反应, 对酶、溶剂、反应温度、底物摩尔比和时间等影响因素进行了优化, 以确定最佳反应条件.由表 1可知, 只有5种酶具有催化活性(表 1, Entries 4~8), 其中爪哇毛霉脂肪酶(Amano lipase M from Mucor javanicus, Amano lipase M)的催化效果较好(表 1, Entry 8), 产率为27%, 蜂蜜曲霉蛋白酶的催化效果次之, 产率为14%(表 1, Entry 4), 而木瓜蛋白酶、脂肪酶和氨基酰化酶的催化效果较差(表 1, Entries 5~7).对照实验结果显示, 非酶蛋白质—牛血清白蛋白(表 1, Entry 13)无催化活性, 无催化剂条件下(表 1, Entry 14)也无产物生成.因此, 选择爪哇毛霉脂肪酶为最佳催化剂进行下一步研究.

表 1

表 1 不同酶的催化剂活性^a

Table 1. Catalytic activities of different enzymes

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Entry	Catalyst	Yield^b/%
1	碱性蛋白酶	0
2	洋葱假单胞菌脂肪酶	0
3	α-糜蛋白酶	0
4	蜂蜜曲霉蛋白酶	14
5	木瓜蛋白酶	7
6	猪胰腺脂肪酶	7
7	氨基酰化酶	8
8	爪哇毛霉脂肪酶	27
9	木聚糖酶	0
10	胰蛋白酶	0
11	纤维素酶	0
12	果胶酶	0
13	牛血清白蛋白	0
14	无酶对照	0
^a Reaction conditions: 2, 5-dihydroxy-1, 4-dithiane (0.3 mmol), cyanoacetamide (0.6 mmol), and catalyst (10 mg) in CH₃OH (2 mL) at 50 ℃ for 12 h. Different enzymes are based on the same weight. ^b Isolated yield after column chromatography.

反应介质对酶促反应效果影响很大, 因此, 考察了爪哇毛霉脂肪酶在不同溶剂中催化模板反应的效果, 结果如表 3所示.爪哇毛霉脂肪酶在乙醇、水、甲醇和乙腈中都有一定的催化活性(表 2, Entries 1~4), 其中以甲醇为溶剂时产率最高.同时也进行了甲醇含水量对酶催化活性的影响实验, 发现在甲醇中加入水会使产率下降, 所以最终选择甲醇为最佳反应介质.

表 3

表 3 不同温度时爪哇毛霉脂肪酶的催化活性^a

Table 3. Catalytic activity of amano lipase M in different temperature

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Entry	Temperature/℃	Yield^b/%
1	30	14
2	40	17
3	50	27
4	60	37
^a Reaction conditions: 2, 5-dihydroxy-1, 4-dithiane (0.3 mmol), cyanoacetamide (0.6 mmol), and amano lipase M (10 mg) in CH₃OH (2 mL) at different temperature for 12 h. ^b Isolated yield after column chromatography.

表 2

表 2 不同溶剂中爪哇毛霉脂肪酶的催化活性^a

Table 2. Catalytic activity of amano lipase M in different solvent

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Entry	Solvent	Yield^b/%
1	CH₃CH₂OH	19
2	H₂O	10
3	CH₃OH	27
4	CH₃CN	17
5	Toluene	0
6	DMSO	0
7	Cyclohexane	0
8	THF	0
9	CCl₄	0
10	V(CH₃OH):V(H₂O)＝4:1	23
11	V(CH₃OH):V(H₂O)＝3:2	18
12	V(CH₃OH):V(H₂O)＝2:3	14
13	V(CH₃OH):V(H₂O)＝1:8	12
^a Reaction conditions: 2, 5-dihydroxy-1, 4-dithiane (0.3 mmol), cyanoacetamide (0.6 mmol), and Amano lipase M (10 mg) in different solvent (2 mL) at 50 ℃ for 12 h; ^b Isolated yield after column chromatography.

温度也是影响酶促反应效果的一个极其重要的因素, 它不仅影响化学反应的速率, 也会影响酶的结构和活性.因此接下来以甲醇为反应介质, 考察了不同温度下爪哇毛霉脂肪酶的催化活性.如表 3所示, 60 ℃下获得了37%的产率(表 3, Entry 4), 考虑到溶剂沸点的原因, 没再继续提高温度, 最终选择60 ℃进行后续研究.

底物摩尔比对反应效果也有较大的影响, 所以又优化了底物摩尔比, 结果如表 4所示. 2, 5-二羟基-1, 4-二噻烷与氰乙酰胺的摩尔比为1:1时产率仅为19%(表 4, Entry 1), 摩尔比为1:3时产率增至45%(表 4, Entry 2);而氰乙酰胺的量继续增加至摩尔比为1:4时产率达65%(表 4, Entry 3), 而摩尔比为1:6和1:8时产率提升已不太明显(表 4, Entries 4~6), 因此选择1:4为最佳摩尔比.

表 4

表 4 底物摩尔比对反应产率的影响^a

Table 4. Effect of molar ratio on the reaction yield

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Entry	Molar ratio^b	Yield^c/%
1	1:1	19
2	1:2	37
3	1:3	45
4	1:4	65
5	1:6	67
6	1:8	68
^a Reaction conditions:Amano lipase M (10 mg) in CH₃OH (2 mL) at 60 ℃ for 12 h; ^b n(2, 5-dihydroxy-1, 4-dithiane):n(cyanoacetamide). ^c Isolated yield after column chromatography.

由于模板反应的两种原料在紫外灯下均不显色, 难以对反应进度进行TLC跟踪, 所以最后又考察了不同时间时的反应效果.结果如表 5所示, 2, 5-二羟基-1, 4-二噻烷与氰乙酰胺反应12 h时, 产率为65%(表 5, Entry 1), 反应24 h时产率増至76%(表 5, Entry 2), 反应时间延长至30 h时, 产率达83%(表 5, Entry 3), 而再延长反应时间产率已无明显提高(表 5, Entry 4), 所以选择反应时间为30 h进行底物拓展.

表 5

表 5 不同反应时间时的反应效果^a

Table 5. Reaction effect in different time

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Entry	Time/h	Yield^b/%
1	12	65
2	24	76
3	30	83
4	36	84
^a Reaction conditions: 2, 5-dihydroxy-1, 4-dithiane (0.3 mmol), cyanoacetamide (1.2 mmol), and Amano lipase M (10 mg) in CH₃OH (2 mL) at 60 ℃ for different time; ^b Isolated yield after column chromatography.

最优条件确定后, 选用多种活性腈为反应底物, 进一步考察了爪哇毛霉脂肪酶催化Gewald反应的底物适用性.由表 6可知, 爪哇毛霉脂肪酶对大多数活性腈都有较高的催化活性, 尤其是丙二腈(表 6, Entry 3)和对氯苯甲酰乙腈(表 6, Entry 9), 产率可高达93%, 主要可归因于电子效应的影响; 而对甲苯磺酰乙腈(表 6, Entry 11)的产率较低, 仅为15%.

表 6

表 6 爪哇毛霉脂肪酶催化Gewald缩合反应合成2-氨基噻吩衍生物^a

Table 6. Synthesis of 2-aminothiophene derivatives via amano lipase M catalyzed Gewald condensation reaction

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Entry	Activated nitrile	Product	Yield^b/%
1			83
2			91
3			93
4			76
5			81
6			89
7			53
8			83
9			93
10			84
11			15
12			64
13			32
^a Reaction conditions: 2, 5-dihydroxy-1, 4-dithiane (0.3 mmol), activated nitrile (1.2 mmol), and amano lipase M (10 mg) in CH₃OH (2 mL) at 60 ℃ for 30 h. ^b Isolated yield after column chromatography.

2. 结论

本文建立了一种通过生物催化的Gewald反应合成2-氨基噻吩类化合物的新型绿色方法, 进一步拓展了酶的非专一性及生物催化在有机合成领域中的应用.

3. 实验部分

3.1 仪器与试剂

Bruker AV-600型核磁共振仪, WRS-1B数字熔点仪, HWCL-1恒温磁力搅拌浴.所用试剂均为市售分析纯, 使用前未经处理.木聚糖酶(50 U/mg)、果胶酶(100 U/mg)、碱性蛋白酶(200 U/mg, 批号: 52014)、木瓜蛋白酶(800 U/mg)、纤维素酶(50 U/mg)购自江苏锐阳生物科技有限公司; 脂肪酶(100 U/mg, 批号: 34178)、氨基酰化酶(0.72 U/mg)、洋葱假单胞菌脂肪酶(30 U/mg)、蜂蜜曲霉蛋白酶(3.3 U/mg)和爪哇毛霉脂肪酶(10 U/mg)购自西格玛奥德里奇(上海)贸易有限公司; α-糜蛋白酶(800 U/mg)、牛血清白蛋白(BSA, 批号: 46769)和胰蛋白酶(≥2500 U/mg, 批号: 34547)购自上海阿拉丁生化科技股份有限公司.

3.2 实验方法

将2, 5-二羟基-1, 4-二噻烷(0.3 mmol)和氰乙酰胺(1.2 mmol)混合于2 mL甲醇中, 以10 mg (100 U)爪哇毛霉脂肪酶为催化剂, 在60 ℃恒温油浴中反应30 h (200 r/min).薄层色谱(TLC)跟踪反应过程, 反应完成后有机相经减压浓缩后, 得到粗产物, 再经柱色谱分离[V(石油醚):V(乙酸乙酯)＝10:1], 得到纯的产物.

2-氨基噻吩-3-甲酰胺(a):白色晶体, 产率83%. m.p. 158~159 ℃ (lit.^[25] 158~160 ℃); ¹H NMR (600 MHz, DMSO-d₆) δ: 7.21 (s, 3H), 7.04 (d, J＝5.8 Hz, 1H), 6.72 (s, 1H), 6.22 (d, J＝5.8 Hz, 1H); ¹³C NMR (150 MHz, DMSO-d₆) δ: 168.00, 162.13, 125.32, 107.62, 105.87.

2-氨基噻吩-3-羧酸乙酯(b):白色晶体, 产率91%. m.p. 42~44 ℃ (lit.^[25] 43~44 ℃); ¹H NMR (600 MHz, CDCl₃) δ: 6.98 (d, J＝5.7 Hz, 1H), 6.18 (d, J＝5.8 Hz, 1H), 5.94 (s, 2H), 4.28 (q, J＝7.1 Hz, 2H), 1.34 (t, J＝7.1 Hz, 3H); ¹³C NMR (150 MHz, CDCl₃) δ: 165.44, 162.63, 125.90, 107.18, 106.86, 59.71, 14.48.

2-氨基噻吩-3-甲腈(c):浅灰色晶体, 产率93%. m.p. 94~96 ℃ (lit.^[25] 94~95 ℃); ¹H NMR (600 MHz, DMSO-d₆) δ: 7.10 (s, 2H), 6.72 (d, J＝5.8 Hz, 1H), 6.38 (d, J＝5.8 Hz, 1H); ¹³C NMR (150 MHz, DMSO-d₆) δ: 165.56, 125.95, 116.91, 109.06, 83.68.

2-氨基噻吩-3-羧酸甲酯(d):白色晶体, 产率76%. m.p. 76~79 ℃ (lit.^[25] 76~81 ℃); ¹H NMR (600 MHz, CDCl₃) δ: 6.96 (d, J＝5.8 Hz, 1H), 6.19 (d, J＝5.8 Hz, 1H), 5.92 (s, 2H), 3.81 (s, 3H); ¹³C NMR (150 MHz, CDCl₃) δ: 165.79, 162.74, 125.78, 107.00, 106.89, 50.97.

2-氨基-3-苯甲酰基噻吩(e):亮黄色晶体, 产率81%. m.p. 146~147 ℃ (lit.^[25] 147~149 ℃); ¹H NMR (600 MHz, CDCl₃) δ: 7.69~7.66 (m, 2H), 7.46 (dt, J＝14.6, 7.2 Hz, 3H), 6.97 (s, 2H), 6.88 (d, J＝5.8 Hz, 1H), 6.13 (d, J＝5.8 Hz, 1H); ¹³C NMR (150 MHz, CDCl₃) δ: 191.26, 166.13, 140.79, 130.74, 128.14, 127.77, 115.14, 106.08.

2-氨基-3-新戊酰基噻吩(f):浅黄色晶体, 产率89%. m.p. 99~101 ℃ (lit.^[25] 99~100 ℃); ¹H NMR (600 MHz, CDCl₃) δ: 7.19 (d, J＝6.0 Hz, 1H), 6.91 (s, 2H), 6.14 (d, J＝6.0 Hz, 1H), 1.33 (s, 9H); ¹³C NMR (150 MHz, CDCl₃) δ: 202.18, 166.42, 126.23, 112.79, 105.34, 43.67, 27.86.

2-氨基-N-苯基噻吩-3-甲酰胺(g):浅灰色晶体, 产率53%. m.p. 154~155 ℃ (lit.^[25] 154~155 ℃); ¹H NMR (600 MHz, DMSO-d₆) δ: 9.32 (s, 1H), 7.68 (d, J＝7.7 Hz, 2H), 7.39 (s, 2H), 7.35~7.28 (m, 3H), 7.03 (t, J＝7.3 Hz, 1H), 6.33 (d, J＝5.9 Hz, 1H); ¹³C NMR (150 MHz, DMSO-d₆) δ: 164.54, 163.36, 139.84, 128.84, 124.76, 123.29, 120.81, 107.41, 106.12.

2-氨基-3-(2-呋喃甲酰基)噻吩(h):亮黄色晶体, 产率83%. m.p. 114~115 ℃ (lit.^[25] 113~114 ℃); ¹H NMR (600 MHz, DMSO-d₆) δ: 8.43 (s, 2H), 7.94 (s, 1H), 7.46 (d, J＝6.0 Hz, 1H), 7.24 (d, J＝3.5 Hz, 1H), 6.69 (dd, J＝3.5, 1.7 Hz, 1H), 6.35 (d, J＝6.0 Hz, 1H); ¹³C NMR (150 MHz, DMSO-d₆) δ: 175.00, 168.75, 153.68, 146.30, 125.75, 116.67, 112.51, 112.05, 107.22.

2-氨基-3-(4-氯苯甲酰基)噻吩(i):亮黄色晶体, 产率93%. m.p. 169~172 ℃ (lit.^[25] 168~170 ℃); ¹H NMR (600 MHz, DMSO-d₆) δ: 8.37 (s, 2H), 7.61 (d, J＝8.5 Hz, 2H), 7.54 (d, J＝8.5 Hz, 2H), 6.73 (d, J＝5.9 Hz, 1H), 6.28 (d, J＝5.9 Hz, 1H); ¹³C NMR (150 MHz, DMSO-d₆) δ: 188.11, 168.14, 139.98, 135.62, 130.08, 128.78, 126.75, 113.15, 106.91.

2-氨基-3-(2-噻吩甲酰基)噻吩(j):亮黄色晶体, 产率84%. m.p. 122~124 ℃ (lit.^[25] 122~124 ℃); ¹H NMR (600 MHz, DMSO-d₆) δ: 8.32 (s, 2H), 7.88~7.86 (m, 1H), 7.74 (dd, J＝3.7, 0.9 Hz, 1H), 7.25~7.20 (m, 2H), 6.36 (d, J＝5.9 Hz, 1H); ¹³C NMR (150 MHz, DMSO-d₆) δ: 179.87, 168.11, 145.67, 132.19, 130.93, 128.52, 125.93, 112.58, 107.36.

2-氨基-3-对甲苯磺酰基噻吩(k):棕褐色晶体, 产率15%. m.p. 128~130 ℃ (lit.^[25] 130~131 ℃); ¹H NMR (600 MHz, DMSO-d₆) δ: 7.79 (d, J＝8.3 Hz, 2H), 7.37 (d, J＝8.0 Hz, 2H), 6.98 (s, 2H), 6.75 (d, J＝5.9 Hz, 1H), 6.38 (d, J＝5.9 Hz, 1H), 2.35 (s, 3H); ¹³C NMR (150 MHz, DMSO-d₆) δ: 160.24, 143.67, 140.94, 130.21, 126.34, 124.70, 111.12, 108.55, 21.40.

2-氨基-3-(2-氯苯甲酰基)噻吩(l):亮黄色晶体, 产率64%. m.p. 140~142 ℃ (lit.^[26] 214~216 ℃); ¹H NMR (600 MHz, DMSO-d₆) δ: 8.42 (s, 2H), 7.56~7.35 (m, 4H), 6.22 (q, J＝5.9 Hz, 2H); ¹³C NMR (150 MHz, DMSO-d₆) δ: 187.51, 167.67, 140.82, 131.00, 130.05, 129.57, 128.67, 127.68, 126.52, 114.08, 107.19, 40.45, 40.29, 40.12, 39.95, 39.79, 39.62, 39.45.

2-氨基-3-(1-吡咯烷甲酰基)噻吩(m):浅灰色晶体, 产率83%. m.p. 161~162 ℃ (lit.^[27] 160~159 ℃); ¹H NMR (600 MHz, DMSO-d₆) δ: 6.91 (d, J＝5.8 Hz, 1H), 6.22 (d, J＝5.8 Hz, 1H), 5.95 (s, 2H), 3.62 (s, 4H), 1.91 (s, 4H); ¹³C NMR (150 MHz, DMSO-d₆) δ: 166.22, 160.93, 125.20, 110.54, 106.30, 77.35, 77.09, 76.84.

辅助材料(Supporting Information) 所合成化合物的核磁共振谱图.这些材料可以免费从本刊网站(http://sioc-journal.cn/)上下载.

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表 1 不同酶的催化剂活性^a

Table 1. Catalytic activities of different enzymes

Entry	Catalyst	Yield^b/%
1	碱性蛋白酶	0
2	洋葱假单胞菌脂肪酶	0
3	α-糜蛋白酶	0
4	蜂蜜曲霉蛋白酶	14
5	木瓜蛋白酶	7
6	猪胰腺脂肪酶	7
7	氨基酰化酶	8
8	爪哇毛霉脂肪酶	27
9	木聚糖酶	0
10	胰蛋白酶	0
11	纤维素酶	0
12	果胶酶	0
13	牛血清白蛋白	0
14	无酶对照	0
^a Reaction conditions: 2, 5-dihydroxy-1, 4-dithiane (0.3 mmol), cyanoacetamide (0.6 mmol), and catalyst (10 mg) in CH₃OH (2 mL) at 50 ℃ for 12 h. Different enzymes are based on the same weight. ^b Isolated yield after column chromatography.

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表 3 不同温度时爪哇毛霉脂肪酶的催化活性^a

Table 3. Catalytic activity of amano lipase M in different temperature

Entry	Temperature/℃	Yield^b/%
1	30	14
2	40	17
3	50	27
4	60	37
^a Reaction conditions: 2, 5-dihydroxy-1, 4-dithiane (0.3 mmol), cyanoacetamide (0.6 mmol), and amano lipase M (10 mg) in CH₃OH (2 mL) at different temperature for 12 h. ^b Isolated yield after column chromatography.

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表 2 不同溶剂中爪哇毛霉脂肪酶的催化活性^a

Table 2. Catalytic activity of amano lipase M in different solvent

Entry	Solvent	Yield^b/%
1	CH₃CH₂OH	19
2	H₂O	10
3	CH₃OH	27
4	CH₃CN	17
5	Toluene	0
6	DMSO	0
7	Cyclohexane	0
8	THF	0
9	CCl₄	0
10	V(CH₃OH):V(H₂O)＝4:1	23
11	V(CH₃OH):V(H₂O)＝3:2	18
12	V(CH₃OH):V(H₂O)＝2:3	14
13	V(CH₃OH):V(H₂O)＝1:8	12
^a Reaction conditions: 2, 5-dihydroxy-1, 4-dithiane (0.3 mmol), cyanoacetamide (0.6 mmol), and Amano lipase M (10 mg) in different solvent (2 mL) at 50 ℃ for 12 h; ^b Isolated yield after column chromatography.

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表 4 底物摩尔比对反应产率的影响^a

Table 4. Effect of molar ratio on the reaction yield

Entry	Molar ratio^b	Yield^c/%
1	1:1	19
2	1:2	37
3	1:3	45
4	1:4	65
5	1:6	67
6	1:8	68
^a Reaction conditions:Amano lipase M (10 mg) in CH₃OH (2 mL) at 60 ℃ for 12 h; ^b n(2, 5-dihydroxy-1, 4-dithiane):n(cyanoacetamide). ^c Isolated yield after column chromatography.

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表 5 不同反应时间时的反应效果^a

Table 5. Reaction effect in different time

Entry	Time/h	Yield^b/%
1	12	65
2	24	76
3	30	83
4	36	84
^a Reaction conditions: 2, 5-dihydroxy-1, 4-dithiane (0.3 mmol), cyanoacetamide (1.2 mmol), and Amano lipase M (10 mg) in CH₃OH (2 mL) at 60 ℃ for different time; ^b Isolated yield after column chromatography.

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表 6 爪哇毛霉脂肪酶催化Gewald缩合反应合成2-氨基噻吩衍生物^a

Table 6. Synthesis of 2-aminothiophene derivatives via amano lipase M catalyzed Gewald condensation reaction

Entry	Activated nitrile	Product	Yield^b/%
1			83
2			91
3			93
4			76
5			81
6			89
7			53
8			83
9			93
10			84
11			15
12			64
13			32
^a Reaction conditions: 2, 5-dihydroxy-1, 4-dithiane (0.3 mmol), activated nitrile (1.2 mmol), and amano lipase M (10 mg) in CH₃OH (2 mL) at 60 ℃ for 30 h. ^b Isolated yield after column chromatography.

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通讯作者: 陈斌, bchen63@163.com

1.
沈阳化工大学材料科学与工程学院沈阳 110142