马鲛鱼抗氧化肽的纳流液相色谱法分离与筛选

薛雅茹 郭睿 张博

引用本文: 薛雅茹, 郭睿, 张博. 马鲛鱼抗氧化肽的纳流液相色谱法分离与筛选[J]. 色谱, 2020, 38(12): 1431-1439. doi: 10.3724/SP.J.1123.2020.04019 shu
Citation:  XUE Yaru,  GUO Rui,  ZHANG Bo. Separation and screening of antioxidant peptides from Scomberomorus niphonius based on nano flow liquid chromatography[J]. Chinese Journal of Chromatography, 2020, 38(12): 1431-1439. doi: 10.3724/SP.J.1123.2020.04019 shu

马鲛鱼抗氧化肽的纳流液相色谱法分离与筛选

    通讯作者: 张博, E-mail:bozhang@xmu.edu.cn
  • 基金项目:

    泉州市科技计划项目(2016N059);黎明职业大学科研团队(LMTD201907);厦门市海洋与渔业发展专项基金项目(19CZB001HJ03).

摘要: 在海洋天然产物中,马鲛鱼是一种重要的高活性抗氧化肽生物源,具有极高的加工附加值。由于鱼体组织的复杂性,活性抗氧化肽成分的提取和筛选对样品制备和分离技术提出了挑战。使用不同蛋白酶对鱼体组织进行酶解时,所获得的活性肽结构及功能活性会有显著的差别。为了获得高活性的抗氧化肽,该研究分别考察了风味蛋白酶、胰蛋白酶、酸性蛋白酶、中性蛋白酶、碱性蛋白酶5种蛋白酶的酶解效果。以二苯代苦味肼基自由基(DPPH·)、羟自由基(·OH)清除率和水解度(DH)为指标,筛选最优水解酶。结果表明,胰蛋白酶酶解液清除DPPH·和·OH能力最强,清除率分别达到88.93%±0.82%和53.09%±0.73%。在单因素试验的基础上,以DPPH·清除率为响应值,以加酶量、酶解温度和时间为函数,进行了三因素三水平响应面试验,获得水解度23.66%、DPPH·清除率93.78%以及·OH清除率62.59%的最优制备条件。纳流液相色谱具有低样品量、低溶剂消耗和高效等优势。为筛选出适合于马鲛鱼内脏抗氧化肽分离分析的固定相,该研究使用1:1000分流比的纳流液相平台,分别使用反相C18柱(15 cm×100 μm,5 μm,30 nm)和强阳离子交换柱(15 cm×100 μm,5 μm,100 nm)进行分离,收集、冻干并评测了各组分的抗氧化能力。结果表明,强阳离子交换固定相更适合于马鲛鱼内脏抗氧化肽的分离纯化,并筛选出1个强活性抗氧化肽组分。该组分DPPH·清除力的半抑制浓度(IC50)为0.672±0.051 mg/mL,与纯化前相比提高了13.6倍。该研究报道了纳流液相色谱在海洋天然产物源抗氧化肽分离分析中的应用,并证明了其在活性抗氧化肽成分筛选中的有效性和良好的应用前景。

English

    1. [1] Chen T, Lu Y F, Ye X F, et al. Food Science & Technology, 2012, 37(9):129 陈涛, 陆云飞, 叶晓峰, 等. 食品科技, 2012, 37(9):129

    2. [2] Zhou D Q, Li N, Wang S S, et al. Journal of Fisheries of China, 2019, 43(1):188 周德庆, 李娜, 王珊珊, 等. 水产学报, 2019, 43(1):188

    3. [3] Ambigaipalan P, Shahidi F. J Funct Foods, 2017, 34:7

    4. [4] Lin D Q, Guo Z B, Zhang Y, et al. Science and Technology of Food Industry, 2016, 37(18):367 林端权, 郭泽镔, 张怡, 等. 食品工业科技, 2016, 37(18):367

    5. [5] Box G, Wilson K B. J R Stat Soc B, 1951(1):1

    6. [6] Mason R L, Gunst R F, Hess J L. Statistical Design and Analysis of Experiments with Applications to Engineering and Science. The United States of America:John Wiley and Sons Publication, 2003

    7. [7] Li L, Zhang S, He Q, et al. Research and Exploration in Laboratory, 2015, 34(8):41 李莉, 张赛, 何强, 等. 实验室研究与探索, 2015, 34(8):41

    8. [8] Song W W, Luo X L, Li G K, et al. Chinese Journal of Chromatography, 2017, 35(1):20 宋雯雯, 罗夏琳, 李攻科, 等. 色谱, 2017, 35(1):20

    9. [9] Nge P N, Rogers C I, Woolley A T. Chem Rev, 2013, 113(4):2550

    10. [10] Ding F F, Zhu J, Guo R, et al. Chinese Journal of Chromatography, 2019, 37(2):20 丁芳芳, 朱珏, 郭睿, 等. 色谱, 2019, 37(2):20

    11. [11] Chen Q M, Liu Q, Shen L, et al. Chinese Journal of Chromatography, 2018, 36(4):388 陈巧梅, 柳青, 申琳, 等. 色谱, 2018, 36(4):388

    12. [12] Hernandez-Borges J H, Aturki Z, Rocco A, et al. J Sep Sci, 2007, 30:1589

    13. [13] Shan Y C, Zhang L H, Zhang Y K. Anal Bioanal Chem, 2013, 405(21):6611

    14. [14] Wang Z D, Zhang L, Guo B Q, et al. Chinese Journal of Chromatography, 2019, 37(5):484 王照地, 张璐, 郭丙倩, 等. 色谱, 2019, 37(5):484

    15. [15] Zhang K, Zhi M Y, He Y, et al. Chinese Journal of Chromatography, 2020, 38(4):445 张恺, 支明玉, 何艺, 等. 色谱, 2020, 38(4):445

    16. [16] Wuhan University. Analytical Chemistry. 6th ed. Beijing:Higher Education Press, 2016 武汉大学. 分析化学. 6版. 北京:高等教育出版社, 2016

    17. [17] Li Z Y, Zhuang W J, Zhang N N, et al. Journal of Chinese Institute of Food Science and Technology, 2016, 16(8):109 李致瑜, 庄玮婧, 张宁宁, 等. 中国食品学报, 2016, 16(8):109

    18. [18] Li Z Y.[MS Dissertation]. Fuzhou:Fujian Agriculture and Forestry University, 2016 李致瑜.[硕士学位论文]. 福州:福建农林大学, 2016

    19. [19] GB 5009.3-2010

    20. [20] GB 5009.5-2016

    21. [21] GB 5009.6-2016

    22. [22] GB 5009.4-2016

    23. [23] Klompong V, Benjakul S, Kantachote D, et al. Food Chem, 2007, 102(4):1317

    24. [24] Wang Y H, Qi S J. Food Analysis. Beijing:China Light Industry Press, 2017 王永华, 戚穗坚. 食品分析. 北京:中国轻工业出版社, 2017

    25. [25] Liu W, Gu R, Lin F, et al. J Sci Food Agric, 2013, 93(11):2782

    26. [26] Zhang M, Mu T H, Sun M J, et al. J Funct Foods, 2014, 7:191

    27. [27] Wang Y, Zheng B D, Zhang Y, et al. Chinese Journal of Tropical Crops, 2012, 33(7):1303 汪颖, 郑宝东, 张怡, 等. 热带作物学报, 2012, 33(7):1303

    28. [28] Xue Y R, Cao R, Lu X, et al. Chinese Journal of Tropical Crops, 2017, 38(3):182 薛雅茹, 操然, 卢旭, 等. 热带作物学报, 2017, 38(3):182

    29. [29] Li N, Zhou D Q, Liu N, et al. Progress in Fishery Sciences, 2020(2):1 李娜, 周德庆, 刘楠, 等. 渔业科学进展, 2020(2):1

    30. [30] You L J.[MS Dissertation]. Guangzhou:South China University of Technology, 2010 游丽君.[硕士学位论文]. 广州:华南理工大学, 2010

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  • 收稿日期:  2020-04-29
通讯作者: 陈斌, bchen63@163.com
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    沈阳化工大学材料科学与工程学院 沈阳 110142

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