免标记比色核酸适配体传感器同步快速检测孔雀石绿和无色孔雀石绿

吴文伟 王翌 刘可鑫 李天松 杨咏洁

引用本文: 吴文伟, 王翌, 刘可鑫, 李天松, 杨咏洁. 免标记比色核酸适配体传感器同步快速检测孔雀石绿和无色孔雀石绿[J]. 色谱, 2020, 38(11): 1332-1339. doi: 10.3724/SP.J.1123.2020.04010 shu
Citation:  WU Wenwei,  WANG Yi,  LIU Kexin,  LI Tiansong,  YANG Yongjie. Simultaneous and rapid determination of malachite green and leucomalachite green by a label-free colorimetric aptasensor[J]. Chinese Journal of Chromatography, 2020, 38(11): 1332-1339. doi: 10.3724/SP.J.1123.2020.04010 shu

免标记比色核酸适配体传感器同步快速检测孔雀石绿和无色孔雀石绿

    通讯作者: 李天松, E-mail:lts0309@163.com; 杨咏洁, E-mail:yjyang@ybu.edu.cn
  • 基金项目:

    国家自然科学基金项目(31602126);吉林省教育厅基金项目(JJKH20180901KJ);延边大学青-基金项目(602017020).

摘要: 研究以双特异性核酸适配体A3作为传感探针、纳米金(AuNPs)为指示剂、NaCl溶液为聚集诱导剂,构建了一种新型的免标记AuNPs比色生物传感器,可实现水产品中孔雀石绿(MG)和无色孔雀石绿(LMG)的同步、快速、可视化检测。该方法的检测原理是核酸适配体A3对MG和LMG有双特异性识别能力,可作为MG和LMG理想的识别受体。它可通过静电作用吸附到AuNPs表面,保护AuNPs并抑制高盐溶液诱导的聚集,AuNPs溶液颜色不变,即为红色;当加入靶标MG或LMG后,该核酸适配体能够与靶标特异性结合,并从AuNPs表面上解离,AuNPs失去保护作用而在高盐溶液诱导下发生聚集,溶液颜色由红变蓝。根据颜色变化,可通过肉眼定性或通过光谱仪定量分析MG和LMG的残留量。该方法首先将50 μL的核酸适配体A3(终浓度150 nmol/L)与150 μL的AuNPs(终浓度1.25 nmol/L)混合,室温孵育6 min。随后加入50 μL待测液,室温孵育30 min。最后加入50 μL NaCl(终浓度150 mmol/L),4 min后观察溶液颜色变化,并分别测定MG和LMG在520 nm和650 nm下的吸光度值。结果表明,在最佳反应条件下,该方法能够特异性检测MG和LMG,而对磺胺嘧啶(SDZ)和硝基呋喃妥因(NFT)无交叉反应;当MG、LMG的浓度为0~17.5 μmol/L时,吸光度比值与靶标浓度呈现良好的线性关系,相关系数(R2)分别为0.9938和0.9715。MG和LMG的检出限分别为6.93 nmol/L和6.38 nmol/L,加标回收率分别为88.60%~93.30%和101.80%~107.00%,相对标准偏差(RSD)分别为2.27%~3.55%和2.62%~3.75%。该方法操作简单,快速和灵敏,可为水产品中MG和LMG的同步快速检测提供一种新方法。

English

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  • 收稿日期:  2020-04-17
通讯作者: 陈斌, bchen63@163.com
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    沈阳化工大学材料科学与工程学院 沈阳 110142

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