4-巯基苯硼酸修饰二维二硫化钼纳米复合材料的制备及其用于N-糖肽特异性富集

张汉卿 秦伟捷 张养军

引用本文: 张汉卿, 秦伟捷, 张养军. 4-巯基苯硼酸修饰二维二硫化钼纳米复合材料的制备及其用于N-糖肽特异性富集[J]. 色谱, 2020, 38(8): 891-899. doi: 10.3724/SP.J.1123.2020.01014 shu
Citation:  ZHANG Hanqing,  QIN Weijie,  ZHANG Yangjun. Preparation of 4-mercaptophenylboronic acid functionalized two-dimensional molybdenum disulfide nanocomposite and its specific enrichment for N-glycopeptide[J]. Chinese Journal of Chromatography, 2020, 38(8): 891-899. doi: 10.3724/SP.J.1123.2020.01014 shu

4-巯基苯硼酸修饰二维二硫化钼纳米复合材料的制备及其用于N-糖肽特异性富集

    通讯作者: 张养军, E-mail:13683167093@163.com
  • 基金项目:

    国家重点研发计划(2017YFA0505002,2018YFC0910302,2016YFA0501403,2018YFF0212505);国家自然科学基金(21675172);蛋白质组学国家重点实验室(SKLP-K201706);北京市泌尿细胞分子诊断重点实验室(2019-KF21).

摘要: 蛋白质的N-糖基化修饰在多种生物过程中发挥着至关重要的作用,近年来的许多研究证实异常的蛋白质糖基化与多种疾病的发生发展密切相关,表明糖基化蛋白质具有较大的潜力成为新的生物标志物或者药物靶标。在样本的处理过程中,对N-糖基化肽段进行富集分离后再进行质谱分析已经成为糖蛋白质组学分析前的必要步骤。但是,由于复杂生物样本中N-糖基化肽段的丰度低和离子化效率差等问题,通过质谱鉴定N-糖肽仍然是一项艰巨的任务。研究通过将纳米金线(Au)、4-巯基苯硼酸(4-MPB)与超薄二维二硫化钼(2D-MoS2)进行反应,成功制备了一种用于富集蛋白质N-糖基化肽段的新型功能纳米复合材料(MoS2/Au/4-MPB)。二硫化钼纳米材料的层状结构可以为反应提供大量的可修饰位点,便于修饰纳米金线;功能基团4-巯基苯基硼酸对N-糖肽具有高度的选择性,可以对生物样品中N-糖基化肽段进行特异性富集。使用标准蛋白人免疫球蛋白G(IgG)和牛血清白蛋白(BSA)胰蛋白酶酶切产物对新型功能纳米材料的N-糖基化肽段的富集性能进行评估,其灵敏度达到5 fmol,选择性达到1:1000。将其用于生物样品中N-糖基化肽段的富集,从50 μg尿液外泌体蛋白胰蛋白酶酶切产物中共富集鉴定出768个N-糖肽,归属于377个蛋白质。这些结果表明该新型功能纳米复合材料对复杂生物样品中N-糖肽的选择富集有着巨大的应用潜力,为糖蛋白质组的研究提供了一种新方法。

English

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  • 收稿日期:  2020-01-14
通讯作者: 陈斌, bchen63@163.com
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    沈阳化工大学材料科学与工程学院 沈阳 110142

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