基于催化发夹组装和荧光共振能量转移的生物传感器检测EV71病毒

田梓佚 徐牧岑 胡顺铭 张楚妍 陈琛 李永新

引用本文: 田梓佚, 徐牧岑, 胡顺铭, 张楚妍, 陈琛, 李永新. 基于催化发夹组装和荧光共振能量转移的生物传感器检测EV71病毒[J]. 分析化学, 2023, 51(1): 93-101. doi: 10.19756/j.issn.0253-3820.221154 shu
Citation:  TIAN Zi-Yi,  XU Mu-Cen,  HU Shun-Ming,  ZHANG Chu-Yan,  CHEN Chen,  LI Yong-Xin. A Biosensor Based on Catalytic Hairpin Assembly and Fluorescence Resonance Energy Transfer for Detection of Enterovirus 71[J]. Chinese Journal of Analytical Chemistry, 2023, 51(1): 93-101. doi: 10.19756/j.issn.0253-3820.221154 shu

基于催化发夹组装和荧光共振能量转移的生物传感器检测EV71病毒

    通讯作者: 李永新,E-mail:liyongxin_2006@163.com
  • 基金项目:

    成都市科技局项目(No.2022-YF05-00296-SN)和四川大学大学生创新创业训练计划项目(No.20221291L)资助。

摘要: 以肠道病毒71型(EV71)为检测对象,建立了基于催化发夹组装(CHA)和荧光共振能量转移(FRET)的生物传感器。设计了检测EV71 VP1基因的CHA信号放大策略,该体系由一对发夹探针(H1、H2)构成,H1和H2分别标记了荧光基团Cy3和Cy5。当体系中有VP1基因时,可引发H1和H2催化自组装反应,从而使得Cy3和Cy5相互靠近并发生FRET,导致Cy3荧光信号降低,Cy5信号增强;当体系中没有VP1基因时,H1和H2则稳定存在于反应体系中,不发生FRET,只检测到Cy3的荧光信号。优化了缓冲液浓度、H1与H2的比例、反应温度和反应时间。在最优条件下,所构建的传感器的Cy5与Cy3的荧光强度比值与EV71 VP1基因浓度在0.5~20nmol/L范围内呈良好的线性关系,检出限为73pmol/L(3σ)。咽拭子样品的加标回收率为99.6%~103.1%,相对标准偏差在0.3%~1.7%之间。本方法具有较好的特异性及抗干扰能力,在EV71监测和手足口病早期诊断方面具有良好的应用前景。

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  • 收稿日期:  2022-03-30
  • 修回日期:  2022-09-24
通讯作者: 陈斌, bchen63@163.com
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    沈阳化工大学材料科学与工程学院 沈阳 110142

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