基于棉花亲水色谱从鸡蛋黄中分离纯化唾液酸化糖肽研究

韩健利 陈庆辉 邹美义 路宇 魏明 李成 王承健 黄琳娟 王仲孚

引用本文: 韩健利,  陈庆辉,  邹美义,  路宇,  魏明,  李成,  王承健,  黄琳娟,  王仲孚. 基于棉花亲水色谱从鸡蛋黄中分离纯化唾液酸化糖肽研究[J]. 分析化学, 2020, 48(1): 34-39. doi: 10.19756/j.issn.0253-3820.191317 shu
Citation:  HAN Jian-Li,  CHEN Qing-Hui,  ZOU Mei-Yi,  LU Yu,  WEI Ming,  LI Cheng,  Separation and Purification of Sialylglycopeptide from Egg Yolk Based on Cotton Hydrophilic Chromatography[J]. Chinese Journal of Analytical Chemistry, 2020, 48(1): 34-39. doi: 10.19756/j.issn.0253-3820.191317 shu

基于棉花亲水色谱从鸡蛋黄中分离纯化唾液酸化糖肽研究

  • 基金项目:

    本文系国家自然科学基金项目(Nos.31670808,31870798)资助

摘要: 鸡蛋黄中的唾液酸化糖肽(Sialylglycopeptide,SGP)的肽段部分由6个氨基酸(KVANKT)组成,其中天冬酰胺(N)被唾液酸化的复杂型N-糖链修饰。SGP主要从鸡蛋黄中分离获得,现有的SGP分离纯化方法操作繁琐,成本较高,难以规模化制备。本研究基于亲水相互作用色谱技术,用医用脱脂棉作为亲水色谱柱的固定相,建立了一种从鸡蛋黄中分离纯化唾液酸化糖肽的方法。首先将鸡蛋黄经苯酚处理得到唾液酸化糖肽的粗品,然后将糖肽粗品用水配成150 mg/mL的溶液,加入制备好的棉花亲水色谱柱中,依次用100%、95%、85%、75%(V/V)的乙腈-水溶液进行除杂,最后用去离子水洗脱唾液酸化糖肽。本方法操作简单,成本低廉。利用本方法从50个鸡蛋黄中制备得到了300 mg SGP,经高效液相色谱(HPLC)鉴定,其纯度高达95%,同时采用电喷雾电离质谱(ESI-MS)和串联质谱(MS/MS)对SGP及其糖链组成和糖基化位点进行了表征。

English


    1. [1]

      Apweiler R, Hermjakob H, Sharon N. Biochim. Biophys. Acta, 1999,1473(1):4-8

    2. [2]

      Agrawal P, Fontanals-Cirera B, Sokolova E, Jacob S, Vaiana C A, Argibay D, Castillo M. Cancer Cell,2017,31(6):804-819

    3. [3]

      Dube D H, Bertozzi C R. Nat. Rev. Drug Disc.,2005,4(6):477-488

    4. [4]

      Haltiwanger R S, Lowe J B. Seminars Cell Develop. Biol.,2010,21(6):638-645

    5. [5]

      Arnold J N, Wormald M R, Sim R B, Rudd P R, Dwek R A. Annu. Rev. Immunol.,2007,25(1):21-50

    6. [6]

      Dwek R A, Butters T D, Platt F M, Zitzmann N. Nat. Rev. Drug Disc.,2002,1(1):65-75

    7. [7]

      Seko A, Koketsu M, Nishizono M, Enoki Y, Ibrahim H R, Juneja L R, Kim M, Yamamoto T. Biochim. Biophys. Acta,1997,1335(1-2):23-32

    8. [8]

      Liu L, Prudden A R, Bosman G P, Boons G J. Carbohyd. Res.,2017,452:122-128

    9. [9]

      Peng W, de Vries R P, Grant O C, Thompson A J, McBride R, Tsogtbaatar B, Paulson J C. Cell Host Microbe,2017,21(1):23-34

    10. [10]

      Sugita-Konishi Y, Sakanaka S, Sasaki K, Juneja L R, Noda T, Amano F. J. Agric. Food Chem.,2002,50(12):3607-3613

    11. [11]

      Koketsu M, Nitoda T, Juneja L R, Kim M, Kashimura N, Yamamoto T. J. Agric. Food Chem.,1995,43(4):858-861

    12. [12]

      Makimura Y, Watanabe S, Suzuki T, Suzuki Y, Ishida H, Kiso M, Katayama T, Kumagai H, Yamamoto K. Carbohyd. Res.,2006,341(11):1803-1808

    13. [13]

      Huang W, Ochiai H, Zhang X, Wang L X. Carbohyd. Res.,2008,343(17):2903-2913

    14. [14]

      Zou Y, Wu Z G, Chen L L, Liu X W, Gu G F, Xue M Y, Wang P G, Chen M. J. Carbohyd. Chem.,2012,31(4-6):436-446

    15. [15]

      Takegawa Y, Deguchi K, Keira T, Ito H, Nakagawa H, Nishimura S. J. Chromatogr. A,2006,1113(1-2):177-181

    16. [16]

      Wohlgemuth J, Karas M, Jiang W, Hendriks R, Andrecht S. J. Sep. Sci.,2010,33(6-7):880-890

    17. [17]

      Selman M H J, Hemayatkar M, Deelder A M, Wuhrer M. Anal. Chem.,2011, 83(7):2492-2499

    18. [18]

      Sha Q, Wu Y, Wang C, Sun B, Zhang Z, Zhang L, Liu X, Sun B, Lin Y. J. Chromatogr. A,2018,1569:8-16

    19. [19]

      Zhang Q, Li H, Feng X, Liu B F, Liu X. PloS One,2014,9(4):e94232

    20. [20]

      Selman M H, McDonnell L A, Palmblad M, Ruhaak L R, Deelder A M, Wuhrer M. Anal. Chem.,2010,82(3):1073-1081

    21. [21]

      Ruhaak L R, Huhn C, Waterreus W J, de Boer A R, Neususs C, Hokke C H, Deelder A M, Wuhrer M. Anal. Chem.,2008,80(15):6119-6126

    22. [22]

      Wuhrer M, de Boer A R, Deelder A M. Mass Spectrom. Rev.,2009,28(2):192-206

    23. [23]

      Mysling S, Palmisano G, Hojrup P, Thaysen-Andersen M. Anal. Chem.,2010,82(13):5598-5609

    24. [24]

      Wada Y, Tajiri M, Yoshida S, Shumi Y. Anal. Chem.,2004,76(22):6560-6565

    25. [25]

      Packer N H, Lawson M A, Jardine D R, Redmond J W. Glycoconjugate J.,1998,15(8):737-747

    26. [26]

      LI Ling-Mei, WANG Cheng-Jian, HAN Jian-Li, LIU Ren-Dan, WEN Ya-Nan, WEI Ming, JIN Wan-Jun, HUANG Lin-Juan, WANG Zhong-Fu. Chem. J. Chinese Universities,2018,39(3):427-434 李玲梅, 王承健, 韩健利, 柳人丹, 温娅楠, 魏明, 晋万军, 黄琳娟, 王仲孚.高等学校化学学报,2018,39(3):427-434

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  • 收稿日期:  2019-06-04
  • 修回日期:  2019-10-10
通讯作者: 陈斌, bchen63@163.com
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    沈阳化工大学材料科学与工程学院 沈阳 110142

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