English

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  马甲子Paliurus ramosissimus(Lour.) Poir.为鼠李科马甲子属植物, 又名铁篱笆、一条龙、铜钱树, 系民间常用草药, 在我国多省均有分布. 《中华本草》记载马甲子叶具有清热解毒功效^[1], 目前国内外对马甲子的化学成分研究相对较少, 马甲子的根、茎的化学成分主要有三萜类、环肽生物碱等^[2~6], 马甲子果化学成分有三萜类、香豆素类和二氢黄酮类等^{[7, 8]}.陈晨等从马甲子叶乙醇提取物分离鉴定了8个化合物, 包括分别为3β-羟基-27-(3, 4-二羟基) 羽扇豆-20(29)-烯-28-酸、美洲茶酸、羽扇豆醇等^[9].涉及生物活性的研究较少.韦国锋等^{[10, 11]}分别于1998年和1999年研究了马甲子水和95%乙醇提取物的镇咳祛痰作用.本课题组^[12]前期研究首次发现马甲子叶醇提物具有一定的体外抗肿瘤活性, 并从马甲子叶醇提物中筛选分离得到了白桦脂酸和马甲子素, 其中马甲子素为新的化合物, 属于白桦脂酸型五环三萜类化合物, 具有一定的体外抗肿瘤活性^[13].为进一步探寻马甲子叶中抗肿瘤活性成分, 本实验从马甲子叶乙醇提取物中分离得到6个化合物, 分别鉴定为2α-O-顺式对羟基肉桂酰基-3α-羟基-27-O-反式对羟基肉桂酰基白桦脂酸 (1)、2α-O-反式对羟基肉桂酰基-3α-羟基-27-O-顺式对羟基肉桂酰基白桦脂酸 (2)、messagenic acid A (3)、messagenic acid B (4)、白桦脂醛 (5) 和β-谷甾醇 (6)(图 1).化合物1, 2为新化合物, 命名为马甲子素A和马甲子素B, 均属于白桦脂酸型五环三萜类化合物.化合物3~6首次从本植物中发现.化合物1~3表现出显著的体外抗肿瘤活性.

  图 1  化合物1~6的结构 Figure 1.  Structures of compounds 1~6

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  1   结果与讨论

  化合物1为白色粉末, m.p. 201~203 ℃, [α]²⁰_D-181.6 (c 0.33, MeOH). IR光谱显示分子含有羟基 (3389 cm^-1) 和羰基 (1702 cm^-1) 等官能团. ESI-MS m/z: 779.48[M-H]^-, 781.49 [M+H]⁺, 803.44 [M+Na]⁺, 819.50 [M+K]⁺.显示该化合物的分子量为780; HRESI-MS m/z:803.4126 [M+Na]⁺(计算值803.4135), 779.4164 [M-H]^-(计算值779.4159), 确定其分子式为C₄₈H₆₀O₉. ¹H NMR (600 MHz, DMSO-d₆) 显示该化合物有5个甲基信号δ_H 0.74, 0.91, 0.92, 0.93, 1.67 (each s, 3H), 其中δ_H1.67为连接在双键上面的甲基氢信号.在低场部分δ_H 7.72 (d, J＝8.4 Hz, 2H), 7.55 (d, J＝8.4 Hz, 2H), 6.79 (d, J＝8.4 Hz, 2H), 6.76 (d, J＝8.4 Hz, 2H), 说明分子中有两个苯环结构, 且苯环为对位取代, 同时在δ_H7.53 (d, J＝15.6 Hz, 1H), 6.82 (d, J＝12.6 Hz, 1H), 6.39 (d, J＝15.6 Hz, 1H), 5.74 (d, J＝12.6 Hz, 1H) 为两个顺反结构双键上面的氢信号. δ_H 12.19, 10.02, 9.87 (1H, s) 为分子中的活泼氢信号.结合¹³C NMR (150 MHz, DMSO-d₆) 和DEPT (无畸变极化转移增强)135°, 该化合物共有48个碳原子信号, 在低场部分δ_C 177.7, 167.1, 166.1为酯羰基碳信号, δ_C 160.3, 159.2, 150.5, 126.0, 125.4为季碳信号, δ_C145.0, 143.3, 133.2, 130.8, 116.6, 116.2, 115.3, 114.9为叔碳信号峰, δ_C110.2为仲碳信号.结合氢谱数据, 说明该化合物有两个对羟基肉桂酰基^[14], 根据它们之间的偶合常数, 可以判断其中一个是反式结构, 另一个是顺式结构^[15].除此之外, 分子中还有一个双键.在DEPT 135°中, δ_C 78.5, 72.5是连氧基团叔碳信号, δ_C62.5是连氧基团仲碳信号.除了两个对羟基肉桂酰基, 该化合物还剩30个碳信号, 再结合¹H NMR, ¹³C NMR和DEPT 135°综合特征, 推断该化合物为C₃₀型三萜结构.由HSQC (异核单量子关系) 对化合物的碳氢信号进行归属, 两个对羟基肉桂酰基通过HMBC (¹H的异核多碳相关谱) 相关来确定. δ_H 4.88 (δ_C 72.5, C-2) 与δ_C166.1 (C-γ) 具有相关, δ_H 4.51 (δ_C 62.5, C-27) 与δ_C167.1 (C-γ′) 具有相关; 同时δ_H 5.74, 6.82与δ_C166.1 (C-γ) 具有相关, δ_H7.53, 6.39与δ_C 167.1 (C-γ′) 具有相关, 说明顺式对羟基肉桂酰基是与母核2位碳相连, 反式对羟基肉桂酰基是与母核27位碳相连. δ_H 1.67 (H-18), 1.82, 1.38 (H-22) 与δ_C177.7 (C-28), 55.5 (C-17) HMBC相关; δ_H 4.71, 4.58 (H-29), 1.68 (H-30) 与δ_C 150.5 (C-20), 46.9 (C-19) 相关; δ_H0.91 (H-23), 0.74 (H-24) 与δ_C 78.5 (C-3), 39.5 (C-4) 相关.以上进一步说明该化合物为2-O-顺式对羟基肉桂酰基-27-O-反式对羟基肉桂酰基白桦脂酸. 2, 3位取代基的相对构型是由NOESY (二维NOE谱) 确定, 在NOESY谱图中δ_H 4.88 (H-2) 与δ_H 3.05 (H-3) 相关, 同时δ_H4.88 (H-2) 与δ_H 0.93 (H-25) 相关, δ_H3.05 (H-3) 与δ_H 0.74 (H-24) 相关, δ_H 0.74 (H-24) 与δ_H 0.93 (H-25) 相关.说明2, 3位取代基均为α构型, 同样从NOESY图谱中可以看出19位取代基为α构型.

  综合以上结构分析, 该化合物鉴定为2α-O-顺式对羟基肉桂酰基-3α-羟基-27-O-反式对羟基肉桂酰基白桦脂酸.经Scifinder检索, 未见有该化合物的相关报道, 确定化合物1为新三萜类结构, 命名为马甲子素A.

  化合物2为白色无定性粉末, m.p. 202~203 ℃, [α]²⁰_D-150.5 (c 0.02, MeOH), ESI-MS负离子m/z: 779.02 [M-H]^-, 正离子m/z: 803.43 [M+Na]⁺, 提示该化合物的分子量为780; HRESI-MS给出m/z: 803.4139 [M+ Na]⁺(计算值803.4135), 779.4150 [M-H]^-(计算值779.4159), 确定该化合物的分子式为C₄₈H₆₀O₉.将化合物2的¹H NMR, ¹³C NMR (DMSO-d₆) 与化合物1进行比较, 发现两者化学位移无明显区别, 说明化合物2同样是二对羟基肉桂酰基取代白桦脂酸三萜类化合物.结合DEPT 135°, 通过HSQC及HMBC对该化合物进行碳氢全归属; 利用HMBC对两个对羟基肉桂酰基的取代位置进行确证: δ_H 4.90 (H-3) 与δ_C166.8 (C-γ) 具有远程相关, δ_H 7.54 (H-α) 与δ_C166.8 (C-γ), 115.5 (C-β), 125.6 (C-1′), 130.5 (C-2′, 6′) 相关, δ_H 6.32 (H-β) 与δ_C166.8 (C-γ), 144.5 (C-α), 125.6 (C-1′) 相关, 根据氢谱的偶合常数, 说明反式对羟基肉桂酰基与母核C-3位相连; δ_H 4.51, 4.41 (H-27) 与δ_C166.6 (C-γ′), 45.4 (C-14) 相关; δ_H 6.87 (H-α′) 与δ_C166.6 (C-γ′), 116.1 (C-β′), 125.9 (C-1″), 132.8 (C-2″, 6″) 具有远程相关, δ_H 5.78 (H-β′) 与δ_C143.8 (C-α′), 166.6 (C-γ′), 125.9 (C-1″) 具有相关, 根据氢谱化学位移及偶合常数, 提示顺式对羟基肉桂酰基是连接在母核的C-27位上.

  综合以上分析, 核磁数据与化合物1比较, 可以推测化合物2与化合物1不同之处在于2, 27位连接的对羟基肉桂酰基不同.故化合物2鉴定为2α-O-反式对羟基肉桂酰基-3α-羟基-27-O-顺式对羟基肉桂酰基白桦脂酸.经Scifinder检索, 未见有该化合物的相关报道, 确定化合物2为新三萜类结构, 命名为马甲子素B.

  化合物3~6为已知化合物, 经波谱分析及文献数据对照, 将它们分别鉴定为messagenic acid A (3)^{[16, 17]}、messagenic acid B (4)^{[16, 17]}、白桦脂醛 (5)^[18]和β-谷甾醇 (6)^[19].

  表 1  化合物1和2的碳氢归属 (DMSO-d₆) Table 1.  ¹H NMR (600 MHz) and ¹³C NMR (150 MHz) data of compounds1 and 2 (DMSO-d₆)

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  No.	Compound1			Compound2
  	δC (150 MHz)	δH (600 MHz)		δC (150 MHz)	δH (600 MHz)
  1	44.0 t	1.94 m, 0.94 m		44.2 t	1.93 m, 0.96 m
  2	72.5 d	4.88 m		72.6 d	4.90 m
  3	78.5 d	3.05 dd, J＝9.6, 6.0 Hz		78.6 d	3.11 d, J＝9.6 Hz
  4	39.5 s			39.5 s
  5	54.8 d	0.88 m		54.9 d	0.87 m
  6	18.4 t	1.43 m, 1.35 m		18.4 t	1.45 m, 1.35 m
  7	35.0 t	1.49 m, 1.42 m		35.0 t	1.40 m, 1.36 m
  8	41.5 s			41.5 s
  9	51.2 d	1.40 m		51.2 d	1.38 m
  10	38.6 s			38.6 s
  11	21.2 t	1.38 m, 1.17 m		21.1 t	1.36 m, 1.17 m
  12	25.1 t	1.66 m, 0.87 m		25.1 t	1.65 m, 0.86 m
  13	38.8 d	2.40 dd, J＝12.6, 2.4 Hz		38.7 d	2.40 t, J＝11.4 Hz
  14	45.6 s			45.4 s
  15	24.0 t	1.75 m, 1.28 m		24.0 t	1.60 m, 1.25 m
  16	32.5 t	2.14 m, 1.18 m		32.5 t	2.06 m, 1.11 m
  17	55.5 s			55.5 s
  18	49.2 d	1.67 m		49.1 d	1.63 m
  19	46.9 d	2.97 m		46.9 d	2.96 m
  20	150.5 s			150.5 s
  21	30.4 t	1.82 m, 1.32 m		30.5 t	1.81 m, 1.31 m
  22	36.6 t	1.81 m 1.38 m		36.6 t	1.81 m 1.35 m
  23	28.8 q	0.91 s		28.8 q	0.92 s
  24	17.3 q	0.74 s		17.3 q	0.74 s
  25	17.8 q	0.93 s		17.8 q	0.93 s
  26	16.5 q	0.92 s		16.5 q	0.90 s
  27	62.5 t	4.51 q, J＝12.6 Hz		62.5 t	4.54 d, J＝12.6 Hz 4.41 d, J＝12.6 Hz
  28	177.7 s			177.8 s
  29	110.2 t	4.71 s, 4.58 s		110.1 t	4.69 s, 4.57 s
  30	19.4 q	1.68 s		19.5 q	1.68 s
  α	143.3 d	6.82 d, J＝12.6 Hz		144.5 d	7.54, d, J＝15.6 Hz
  β	116.6 d	5.74 d, J＝12.6 Hz		115.5 d	6.32, d, J＝15.6 Hz
  γ	166.1 s			166.8 s
  1′	126.0 s			125.6 s
  2′, 6′	133.2 d	7.71 d, J＝8.4 Hz		130.5 d	7.51 d, J＝8.4 Hz
  3′, 5′	116.2 d	6.79 d, J＝8.4 Hz		115.4 d	6.76 d, J＝8.4 Hz
  4′	160.3 s			159.3 s
  α′	145.0 d	7.53, d, J＝15.6 Hz		143.8 d	6.87 d, J＝12.6 Hz
  β′	114.9 d	6.39 d, J＝15.6 Hz		116.1 d	5.78 d, J＝12.6 Hz
  γ′	167.1 s			166.6 s
  1″	125.4 s			125.9 s
  2″, 6″	130.8 d	7.55 d, J＝8.4 Hz		132.8 d	7.65 d, J＝8.4 Hz
  3″, 5″	115.3 d	6.76 d, J＝8.4 Hz		116.2 d	6.80 d, J＝8.4 Hz
  4″	159.2 s			160.2 s

  表 1  化合物1和2的碳氢归属 (DMSO-d₆)
  Table 1.  ¹H NMR (600 MHz) and ¹³C NMR (150 MHz) data of compounds1 and 2 (DMSO-d₆)

  采用四甲基偶氮唑蓝 (MTT) 法检测化合物1~3对两株人肝脏肿瘤细胞 (BEL7404和QGY7703) 增值抑制作用, 化合物1~3与阳性对照药物氟脲嘧定 (5-Fluo-rouracil) 相比, 均有显著体外肿瘤细胞生长抑制活性, 其对不同细胞的IC₅₀值见表 2.

  表 2  化合物1~3对不同细胞的IC₅₀值 (μmmol/L) Table 2.  IC₅₀ (μmmol/L) of compounds 1~3 against different cell lines

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  Compd.	BEL7404	QGY7703
  1	3.87	5.44
  2	2.50	4.23
  3	5.49	13.88
  5-Fluorouracil	32	35

  表 2  化合物1~3对不同细胞的IC₅₀值 (μmmol/L)
  Table 2.  IC₅₀ (μmmol/L) of compounds 1~3 against different cell lines

  2   实验部分

  2.1   仪器与试剂

  柱色谱硅胶 (100~200, 300~400目) 和薄层色谱硅胶 (青岛海洋化工厂产品); Bruker AV II-400 (600) MHz核磁共振仪 (TMS为内标, 瑞士Bruker公司); 美国赛默飞尼高力红外光谱仪Nicolet iS50; Quattro Premier XE质谱仪 (美国Waters公司); Q-TOF Premier高分辨质谱仪 (美国Waters公司); 轴向压缩柱100系统APS-2004(北京创新通恒科技有限公司); ultimate xb-c18(美国Welch公司); Sartorius BS210S电子天平 (北京赛多利斯天平有限公司); Mettler Toledo超越系列专业型XS分析天平 (梅特勒-托利多有限公司); XMTD-8222真空干燥箱 (上海精宏实验设备有限公司); FZ102粉碎机 (北京中兴伟业仪器有限公司); 1200高效液相色谱仪 (美国安捷伦公司).试剂均为分析纯. DMEM培养基, 胎牛血清 (Hyclone, 美国), 3-(4, 5-二甲基噻唑-2)-2, 5-二苯基四氮唑溴盐 (MTT), 青霉素、链霉素 (Amresco, 美国), 胰蛋白酶 (Gibco, 美国), 人肝癌细胞BEL7404, QGY7703(四川大学华西药学院靶向药物及释药系统教育部重点实验室提供). 5-FU注射液 (天津金耀氨基酸有限公司). Thermo Forma系列CO₂培养箱 (Sanyo, 日本); Model-550型酶联免疫检测仪 (Bio-Rad, 美国); SW-CJ-2D型超净工作台 (苏州市净化设备总厂); 倒置显微镜 (型号Fx-35DX, Nikon); 离心机 (型号TGL-16G, 上海医用分析仪器厂).

  图 2  化合物1和2的主要HMBC相关 Figure 2.  Key HMBC correlations for compounds 1 and 2

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  图 3  化合物1和2的主要NOSEY相关 Figure 3.  Key NOSEY correlations for compounds 1 and 2

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  2.2   药材标本

  实验用马甲子 (多年生) 于2013年7月采自四川省双流县牧马山, 经四川省中医药科学院舒光明研究员鉴定为鼠李科马甲子属植物马甲子Paliurus ramosissimus(Lour.) Poir..

  2.3   提取分离

  取马甲子20 kg粉碎, 用95%乙醇10倍量浸泡3 d, 收集浸提液, 减压浓缩得浸膏约1.5 kg.总浸膏用水分散后依次用石油醚、乙酸乙酯和正丁醇萃取, 得到乙酸乙酯萃取物450 g.再将其经硅胶柱色谱分离, 采用氯仿-甲醇 (V:V＝100:0→0:100) 梯度洗脱, 薄层色谱检测得到7个流分 (Fr.A~Fr.G). Fr.F (约38 g) 经MCI柱分离, 乙醇-水系统 (50%→95%) 依次洗脱, 高效液相色谱检测收集得到4个流分 (Fr.F1~Fr.F4). Fr.F4经制备HPLC (流动相63%乙腈水溶液) 纯化得化合物1 (25.1 mg, t_R＝22.5 min). Fr.F4制备流出液经制备HPLC (流动相62%乙腈水溶液) 得化合物4(15.5 mg, t_R＝26.0 min). Fr.F4制备流出液经制备HPLC (流动相63%乙腈水溶液) 得化合物3(22.2 mg, t_R＝25.5 min). Fr.F4制备流出液经制备HPLC (流动相63%乙腈水溶液) 得化合物2(24.3 mg, t_R＝25.5 min). Fr.B (约24 g) 经硅胶柱层析, 采用氯仿-甲醇 (V:V＝100:1→1:1) 梯度洗脱, 得到4个部分 (Fr.B1~Fr.B4). Fr.B4经反复硅胶柱层析, 得到化合物5 (46.1 mg) 和6(35.0 mg).

  2.4   抗肿瘤活性测试

  按文献[20]方法复苏BEL7404细胞和QGY7703细胞.取对数生长期细胞, 用含10%胎牛血清的改良杜氏伊格尔培养基制成1×105个/mL单细胞悬液, 接种于96孔板中, 置37 ℃, 5% CO₂培养箱培养至细胞贴壁后, 加入不同浓度的化合物1~3和5-Fu注射液 (阳性对照), 每组设复孔4个, 同时设立阴性对照、空白对照组, 继续培养72 h.吸去上清液, 用含0.5 mg/ mL MTT的无血清DMEM孵育3 h后, 弃上清液, 每孔加入150 μL DMSO, 在酶标仪上于490 nm处检测各吸光度 (A) 值.实验重复3次.按下列公式计算细胞生长抑制率, 通过spss软件^[21]计算IC₅₀值.

  辅助材料 (Supporting Information)新化合物1的红外光谱, 新化合物1和2的质谱、高分辨质谱、1D/2D NMR谱图.这些材料可以免费从本刊网站 (http://sioc-journal.cn/) 上下载.

• 1. [1]

     中华本草, 上海科学技术出版社, 上海, 1999, p. 242.Chinese Materia Medica, Shanghai Science and Technology Press, Shanghai, 1999, p. 242 (in Chinese).

  2. [2]

     Lee, S. S.; Su, W. C.; Liu, K. C. Nat. Prod. 1991, 54, 615. doi: 10.1021/np50074a047

  3. [3]

     Lee, S. S.; Lin, C. J.; Liu, K. C. Nat. Prod. 1992, 55, 602. doi: 10.1021/np50083a007

  4. [4]

     Lin, H. Y.; Chen, C. H.; Liu, K. C.; Lee, S. S. Helv. Chim. Acta 2003, 86, 127. doi: 10.1002/(ISSN)1522-2675

  5. [5]

     Lin, H. Y.; Chen, C. H.; You, B. J.; Liu, K. C.; Lee, S. S. Nat. Prod. 2000, 63, 1338. doi: 10.1021/np000136a

  6. [6]

     Lee, S. S.; Su, W. C.; Liu, K. C. S. C. Phytochemistry 2001, 58, 1271. doi: 10.1016/S0031-9422(01)00234-5

  7. [7]

     于磊, 张东明, 中国中药杂志, 2006, 31, 2049. http://www.cjcmm.com.cn/cjcmm/ch/reader/view_abstract.aspx?file_no=8118Yu, L.; Zhang, D. M. China J. Chin. Mater. Med. 2006, 31, 2049 (in Chinese). http://www.cjcmm.com.cn/cjcmm/ch/reader/view_abstract.aspx?file_no=8118

  8. [8]

     于磊, 杨敬芝, 张东明, 药学学报, 2009, 44, 625. http://www.cnki.com.cn/Article/CJFDTotal-YXXB200906014.htmYu, L.; Yang, J. Z.; Zhang, D. M. Acta Pharm. Sin. 2009, 44, 625 (in Chinese). http://www.cnki.com.cn/Article/CJFDTotal-YXXB200906014.htm

  9. [9]

     Chen, C.; Luo, G. D.; Hu, R.; Fu, H. Z. J. Chin. Pharm. Sci. 2016, 111.

  10. [10]

      韦国锋, 覃道光, 黄志文, 数理医药学杂志, 1999, 12, 165. http://www.cnki.com.cn/Article/CJFDTotal-SLYY902.040.htmWei, G. F.; Qin, D. G.; Huang, Z. W. J. Math. Med. 1999, 12, 165 (in Chinese). http://www.cnki.com.cn/Article/CJFDTotal-SLYY902.040.htm

  11. [11]

      韦国锋, 覃道光, 黄志文, 右江民族医学院学报, 1998, 20, 176. http://www.cnki.com.cn/Article/CJFDTotal-YJMZ802.002.htmWei, G. F.; Qin, D. G.; Huang, Z. W. J. Youjiang Med. Coll. Nationalities 1998, 20, 176 (in Chinese). http://www.cnki.com.cn/Article/CJFDTotal-YJMZ802.002.htm

  12. [12]

      高媛, 宋联强, 樊梅, 袁志翔, 余悦, 徐超群, 华西药学杂志, 2015, 3, 303. http://www.cnki.com.cn/Article/CJFDTotal-HXYO201503013.htmGao, Y.; Song, L. Q.; Fan, M.; Yuan, Z. X.; Yu, Y.; Xu, C. Q. West China J. Pharm. Sci. 2015, 3, 303 (in Chinese). http://www.cnki.com.cn/Article/CJFDTotal-HXYO201503013.htm

  13. [13]

      武蕊娟, 宋联强, 谭镭, 詹雁, 阮佳, 中草药, 2015, 19, 2834. http://www.cnki.com.cn/Article/CJFDTotal-ZCYO201519006.htmWu, R. J.; Song, L. Q.; Tan, L.; Zhan, Y.; Ruan, J.; Xu, C. C. Chin Tradit. Herb. Drugs 2015, 19, 2834 (in Chinese). http://www.cnki.com.cn/Article/CJFDTotal-ZCYO201519006.htm

  14. [14]

      吴立军, 相婷, 刘铁汉, 田燕, 王永奇, 高之杨, 陈莉, 中草药, 1998, 6, 367. http://www.tiprpress.com/zcy/ch/reader/view_abstract.aspx?file_no=19980603&flag=1Wu, L. J.; Xiang, T.; Liu, T. H.; Tian, Y.; Wang, Y. Q.; Gao, Z. Y.; Chen, L. Chin Tradit. Herb. Drugs 1998, 6, 367 (in Chinese). http://www.tiprpress.com/zcy/ch/reader/view_abstract.aspx?file_no=19980603&flag=1

  15. [15]

      王晓霞, 高慧媛, 姜勇, 赵明波, 吴立军, 屠鹏飞, 中草药, 2013, 10, 1241. http://www.tiprpress.com/zcy/ch/reader/view_abstract.aspx?file_no=201310005&flag=1Wang, X. X.; Gao, H. Y.; Jiang, Y.; Zhao, M. B.; Wu, L. J.; Tu, P. F. J. Chin Tradit. Herb. Drugs 2013, 10, 1241 (in Chinese). http://www.tiprpress.com/zcy/ch/reader/view_abstract.aspx?file_no=201310005&flag=1

  16. [16]

      Cortez, D. A. G.; Young, M. C. M.; Marston, A. Phytochemistry 1998, 47, 1367. doi: 10.1016/S0031-9422(97)00731-0

  17. [17]

      Suksamrarn, A.; Tanachatchairatana, T.; Kanokmedhakul, S. J. Ethnopharmacol. 2003, 88, 275. doi: 10.1016/S0378-8741(03)00261-7

  18. [18]

      Theerachayanan, T.; Sirithunyalug, B.; Piyamongkol, S. CMU J. Nat. Sci. 2007, 6, 253.

  19. [19]

      徐润生, 袁珂, 殷明文, 方磊杰, 毛浓浓, 中草药, 2009, 7, 1015. http://www.cnki.com.cn/Article/CJFDTotal-ZCYO200907005.htmXu, R. S.; Yuan, K.; Yin, M. W.; Fang, L. J.; Mao, N. N. Chin Tradit. Herb. Drugs 2009, 7, 1015 (in Chinese). http://www.cnki.com.cn/Article/CJFDTotal-ZCYO200907005.htm

  20. [20]

      司徒镇强, 吴军正, 细胞培养, 世界图书出版公司, 西安, 2007, p. 79.Situ, Z. Q.; Wu, J. Z. Cell Culture, World Book Inc, Xi'an, 2007, p. 79 (in Chinese).

  21. [21]

      周一平, 药学进展, 2003, (5), 314.Zhou, Y. P. Prog. Pharm. Sci. 2003, (5), 314 (in Chinese).

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  图 1  化合物1~6的结构

  Figure 1  Structures of compounds 1~6

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  图 2  化合物1和2的主要HMBC相关

  Figure 2  Key HMBC correlations for compounds 1 and 2

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  图 3  化合物1和2的主要NOSEY相关

  Figure 3  Key NOSEY correlations for compounds 1 and 2

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  表 1  化合物1和2的碳氢归属 (DMSO-d₆)

  Table 1.  ¹H NMR (600 MHz) and ¹³C NMR (150 MHz) data of compounds1 and 2 (DMSO-d₆)

  No.	Compound1			Compound2
  	δC (150 MHz)	δH (600 MHz)		δC (150 MHz)	δH (600 MHz)
  1	44.0 t	1.94 m, 0.94 m		44.2 t	1.93 m, 0.96 m
  2	72.5 d	4.88 m		72.6 d	4.90 m
  3	78.5 d	3.05 dd, J＝9.6, 6.0 Hz		78.6 d	3.11 d, J＝9.6 Hz
  4	39.5 s			39.5 s
  5	54.8 d	0.88 m		54.9 d	0.87 m
  6	18.4 t	1.43 m, 1.35 m		18.4 t	1.45 m, 1.35 m
  7	35.0 t	1.49 m, 1.42 m		35.0 t	1.40 m, 1.36 m
  8	41.5 s			41.5 s
  9	51.2 d	1.40 m		51.2 d	1.38 m
  10	38.6 s			38.6 s
  11	21.2 t	1.38 m, 1.17 m		21.1 t	1.36 m, 1.17 m
  12	25.1 t	1.66 m, 0.87 m		25.1 t	1.65 m, 0.86 m
  13	38.8 d	2.40 dd, J＝12.6, 2.4 Hz		38.7 d	2.40 t, J＝11.4 Hz
  14	45.6 s			45.4 s
  15	24.0 t	1.75 m, 1.28 m		24.0 t	1.60 m, 1.25 m
  16	32.5 t	2.14 m, 1.18 m		32.5 t	2.06 m, 1.11 m
  17	55.5 s			55.5 s
  18	49.2 d	1.67 m		49.1 d	1.63 m
  19	46.9 d	2.97 m		46.9 d	2.96 m
  20	150.5 s			150.5 s
  21	30.4 t	1.82 m, 1.32 m		30.5 t	1.81 m, 1.31 m
  22	36.6 t	1.81 m 1.38 m		36.6 t	1.81 m 1.35 m
  23	28.8 q	0.91 s		28.8 q	0.92 s
  24	17.3 q	0.74 s		17.3 q	0.74 s
  25	17.8 q	0.93 s		17.8 q	0.93 s
  26	16.5 q	0.92 s		16.5 q	0.90 s
  27	62.5 t	4.51 q, J＝12.6 Hz		62.5 t	4.54 d, J＝12.6 Hz 4.41 d, J＝12.6 Hz
  28	177.7 s			177.8 s
  29	110.2 t	4.71 s, 4.58 s		110.1 t	4.69 s, 4.57 s
  30	19.4 q	1.68 s		19.5 q	1.68 s
  α	143.3 d	6.82 d, J＝12.6 Hz		144.5 d	7.54, d, J＝15.6 Hz
  β	116.6 d	5.74 d, J＝12.6 Hz		115.5 d	6.32, d, J＝15.6 Hz
  γ	166.1 s			166.8 s
  1′	126.0 s			125.6 s
  2′, 6′	133.2 d	7.71 d, J＝8.4 Hz		130.5 d	7.51 d, J＝8.4 Hz
  3′, 5′	116.2 d	6.79 d, J＝8.4 Hz		115.4 d	6.76 d, J＝8.4 Hz
  4′	160.3 s			159.3 s
  α′	145.0 d	7.53, d, J＝15.6 Hz		143.8 d	6.87 d, J＝12.6 Hz
  β′	114.9 d	6.39 d, J＝15.6 Hz		116.1 d	5.78 d, J＝12.6 Hz
  γ′	167.1 s			166.6 s
  1″	125.4 s			125.9 s
  2″, 6″	130.8 d	7.55 d, J＝8.4 Hz		132.8 d	7.65 d, J＝8.4 Hz
  3″, 5″	115.3 d	6.76 d, J＝8.4 Hz		116.2 d	6.80 d, J＝8.4 Hz
  4″	159.2 s			160.2 s

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  表 2  化合物1~3对不同细胞的IC₅₀值 (μmmol/L)

  Table 2.  IC₅₀ (μmmol/L) of compounds 1~3 against different cell lines

  Compd.	BEL7404	QGY7703
  1	3.87	5.44
  2	2.50	4.23
  3	5.49	13.88
  5-Fluorouracil	32	35

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